内蒙古地区骆驼生活环境蝇种分类与COI基因序列比较

论文摘要

为了解内蒙古草原地区骆驼生活环境中蝇种及分布情况,探讨不同蝇种作为骆驼斯氏副柔线虫（Parabronema skrjabini）病传播媒介的可能性,并从分子分类学水平掌握蝇种间的相互联系,于2007-2009年的7～9月对3个荒漠化草原地区骆驼生活环境中的蝇种进行了采集和调查;并利用传统的形态学分类方法对其进行了种属区分。之后再提取捕获到的蝇种全基因组DNA,利用UEA3和UEA10蝇类通用引物扩增各个蝇种的COI基因序列,进行克隆和测序,最后用DNASTAR生物软件对其序列进行分析和比较,建立分子系统发育树并进行同源性比较。经形态学鉴定,共发现和确定蝇类7科17属25种,另有2个科（扁蝇科和锯翅蝇科）未鉴定到属种。在已确定的蝇种中,内蒙古地区新记录的蝇种有12种。内蒙古巴彦淖尔地区优势蝇种为花蝇科（Anthomyiidae）的迷隰蝇（Hydrophoria ambigua）,占该地区采集总蝇数的37.2%;其次所占比例较大的为蝇科（Muscidae）的截脉角蝇（Haematobia titillans）,占23.0%。阿拉善地区所占比例最大的是扁蝇（Coelopidae）,约为31.5%;粪蝇科（Scathophagidae）的小纹鬃粪蝇（Norellia striolata）占26.5%;其他蝇种所占比例均较小。乌兰察布地区锯翅蝇（Trixoscelidae）所占比例最大,为43.4%;紧随其后的是蝇科（Muscidae）中的海滨溜蝇（Lispe litorea）和吸溜蝇（Lispe consanguinea）,分别为10.6%和12.4%。分子分类学研究表明,19种蝇的COI序列差异性在0.1%～22.8%之间,同源性在78.2%～99.9%之间。不同科之间大部分蝇种差异显著,科内不同属间差异也较明显。19种蝇COI核苷酸序列中A+T的含量为67.44%～72.62%,C+G的含量为27.38%～32.56%,A+T的比例明显高于C+G;COI序列碱基中共有481个变异位点。通过上述研究,基本上掌握了内蒙古地区骆驼生活环境蝇种的组成,为斯氏副柔线虫传播媒介的筛选确定提供了重要的基础数据;并且了解了各蝇种之间的亲缘关系和系统发育进化,填补了相关研究领域的空白,为今后的深入研究奠定了重要基础。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 文献综述部分
• 1 双翅目昆虫概况
• 1.1 双翅目昆虫形态
• 1.2 双翅目昆虫生活史
• 1.3 双翅目昆虫的习性
• 1.4 双翅目昆虫的分类
• 1.5 双翅目昆虫与人类的关系
• 1.6 蝇类资源的利用
• 2 骆驼与斯氏副柔线虫概况
• 3 分子生物学在昆虫研究中的应用
• 3.1 分子系统学的概念及应用
• 3.2 mtDNA 在昆虫系统学上的应用
• 4 本研究的目的与意义
• 研究部分
• 研究一 骆驼生活环境蝇种形态学分类鉴定
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 主要器械
• 1.1.2 化学试剂
• 1.2 方法
• 1.2.1 蝇类样本采集
• 1.2.2 蝇翅标本制备
• 1.2.3 蝇类种属鉴定
• 2 结果
• 2.1 蝇种分类鉴定
• 2.2 蝇种形态描述
• 2.2.1 亮家蝇
• 2.2.2 厩螫蝇
• 2.2.3 海滨溜蝇
• 2.2.4 吸溜蝇
• 2.2.5 黄粉寄蝇
• 2.2.6 笨长足寄蝇
• 2.2.7 坡巨爪麻蝇
• 2.2.8 伏蝇
• 2.2.9 亚洲毛蚤蝇
• 2.2.10 东亚异蚤蝇
• 2.2.11 中亚灰粪种蝇
• 2.2.12 中华莫蝇
• 2.2.13 迷隰蝇
• 2.2.14 黑基地种蝇
• 2.3 蝇种分类检索
• 3 讨论
• 4 小结
• 研究二 骆驼生活环境蝇类 COI 基因序列分析
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 主要试验材料
• 1.1.2 主要试验器材
• 1.1.3 主要试验试剂
• 1.2 方法
• 1.2.1 溶液配制
• 1.2.2 DNA 提取
• 1.2.3 PCR 反应
• 2 结果
• 2.1 PCR 产物检测结果
• 2.2 测序结果
• 2.3 克隆结果
• 2.4 序列分析结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录（14 个蝇种COI 序列）
• 作者简介