绿豆降血糖活性研究

论文摘要

绿豆（Vinga radiata L.）属于菜豆族（phaseoleae）豇豆属（Vigna）植物中的一个栽培品种,历来被作为药食兼用的杂粮作物,其功效成分主要有牡荆素、异牡荆素和D-手性肌醇等。本研究以绿豆及其豆芽为研究对象,采用现代植物化学技术研究了绿豆功能成分提取方法,并对绿豆核心种质牡荆素、异牡荆素和D-手性肌醇含量进行测定;采用发芽方法富集绿豆中的D-手性肌醇,并进一步研究了绿豆芽的降血糖活性。通过优化色谱条件,牡荆素和异牡荆素两峰得到很好的分离,且峰形良好,出峰时间短,提高了工作效率。确定的色谱条件为:Shimadzum LC-20A高效液相色谱仪;色谱柱为Alltech C18柱（4.6×250 mm, 5μm）;流动相为A:乙腈B:水（0.2%乙酸）,0到18 minB由5 %增加到25%,18到30 min B由25%增加到90%;流速:0.8 mL/min ;检测波长: 360 nm。D-手性肌醇色谱条件为,色谱柱: Prevail Carbohydrates柱（4.6×250 mm, 5μm）;流动相:乙腈:水=70:30;流速:1.0 mL/min;蒸发光条件:95℃,气流速:2.2 L/min。利用正交设计试验,考察溶剂浓度、提取温度、提取时间对功能成分提取率的影响,筛选出绿豆最优工艺条件为:40℃,75 %浓度的乙醇提取120 min。在国家农作物种质保存中心提供的500多份核心种质中,随机选取110份,分别进行牡荆素、异牡荆素和D-手性肌醇含量测定,筛选出各10份极高、极低含量品种。用Ⅱ型糖尿病小鼠模型来研究绿豆芽降血糖作用。其中包括雄性KK-Ay和C51BL/6鼠。KK-Ay鼠血糖血清C-肽水平、胰高血糖素、总胆固醇、甘油三酯和尿素氮水平显著高于C57BL/6鼠（p< 0.001,p< 0.001, p< 0.01, p< 0.001, p< 0.01, p< 0.01）。并且KK-Ay鼠胰岛组织中免疫组化反应明显降低。连续5周灌胃KK-Ay鼠豆芽提取物,结果显示高剂量豆芽提取物组（3 g/kg）可降低血糖、血清C-肽水平、胰高血糖素、总胆固醇、甘油三酯和尿素氮水平。与此同时,葡萄糖耐量水平及胰岛素免疫组化水平提高。结果显示豆芽提取物对二型糖尿病小鼠有降血糖作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 绿豆的化学成分
• 1.2 绿豆的药用作用
• 1.2.1 抗氧化作用
• 1.2.2 抗肿瘤作用
• 1.2.3 抗菌、抑菌作用
• 1.2.4 降血脂作用
• 1.2.5 解毒作用
• 1.2.6 放射保护作用
• 1.2.7 抑制糖基化终产物形成
• 1.2.8 抗疲劳作用
• 1.3 降血糖食品研究进展
• 1.3.1 苦荞的降血糖作用
• 1.3.2 豆类的降血糖作用
• 1.3.3 南瓜多糖的降血糖作用
• 1.3.4 苦瓜的降血糖作用
• 1.4 研究目的与意义
• 第二章 绿豆降血糖成分提取方法研究
• 2.1 牡荆素及异牡荆素含量测定
• 2.1.1 试验材料、试剂与仪器
• 2.1.2 溶液的配制
• 2.1.3 色谱条件
• 2.1.4 牡荆素方法学考察
• 2.1.5 异牡荆素方法学考察
• 2.2 D-手性肌醇含量测定
• 2.2.1 试验材料、试剂与仪器
• 2.2.2 溶液的配制
• 2.2.3 色谱条件
• 2.2.4 D-手性肌醇方法学考察
• 2.3 液相色谱-质谱联用分析
• 2.3.1 对牡荆素、异牡荆素分析
• 2.3.2 对D-手性肌醇分析
• 2.4 绿豆提取物制备工艺研究
• 2.4.1 实验材料、试剂与仪器
• 2.4.2 实验方法
• 2.5 讨论
• 2.5.1 绿豆降血糖组分分析
• 2.5.2 绿豆提取工艺优化
• 第三章 绿豆核心种质牡荆素、异牡荆素、D-手性肌醇含量测定及D-手性肌醇的生物富集
• 3.1 绿豆核心种质牡荆素、异牡荆素、D-手性肌醇含量测定
• 3.1.1 材料与方法
• 3.1.2 实验结果
• 3.2 D-手性肌醇的生物富集
• 3.2.1 材料与方法
• 3.2.2 仪器设备
• 3.2.3 试验方法
• 3.2.4 试验结果
• 3.3 讨论
• 第四章 绿豆芽降血糖活性研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 试验材料与试剂
• 4.1.2 仪器设备
• 4.1.3 试验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 体内降血糖活性结果
• 4.3 讨论
• 4.3.1 绿豆芽提取物对血糖的影响
• 4.3.2 模型鼠的选择
• 4.3.3 口服糖耐量
• 4.3.4 C-肽含量测定
• 4.3.5 胰高血糖素含量测定
• 4.3.6 绿豆芽降血糖作用机制
• 第五章 绿豆芽降血糖作用机理研究
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 试验材料与试剂
• 5.1.2 仪器设备
• 5.1.3 试验方法
• 5.2 试验结果
• 5.2.1 对甘油三酯水平的影响
• 5.2.2 对总胆固醇水平的影响
• 5.2.3 对尿素氮水平的影响
• 5.2.4 对胰腺组织结构的影响
• 5.2.5 对肝脏组织结构的影响
• 5.2.6 对肾脏组织结构的影响
• 5.3 讨论
• 5.3.1 降血脂和改善肾功能作用
• 5.3.2 对胰岛、肝、肾组织的作用
• 第六章 结论与讨论
• 6.1 绿豆提取工艺优化条件
• 6.2 绿豆核心种质降糖物质含量测定及生物富集D-手性肌醇
• 6.3 绿豆芽具有降低血糖活性,具有预防和治疗糖尿病并发症的作用
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历