热冲击对家蚕五龄幼虫抗氧化酶的影响

论文摘要

家蚕(Bombyx mori)属于变温动物,温度的变化对其影响显著。本研究利用分光光度法、实时荧光定量PCR等技术,通过测定家蚕5龄幼虫在热冲击下脂肪体等组织中抗氧化酶活性及其相关基因转录水平的变化,探讨了家蚕的抗高温逆境的生化及分子机制,获得了以下结果:1、比较了热冲击对家蚕二化性品种7532和大造5龄幼虫死亡率及丝腺、中肠和脂肪体组织中抗氧化酶活性的影响。结果表明:家蚕7532品种抗热冲击能力较家蚕大造品种强,这与其组织中抗氧化酶活性的变化有关,热冲击下家蚕2品种5龄幼虫组织中抗氧化酶活性的变化存在显著差异,在抗氧化酶SOD、CAT和GST活性的变化中,GST的活性变化更能反映家蚕抗热冲击能力,可以作为家蚕品种选育中抗高温能力评价的生理生化指标。2、测定分析了家蚕5龄幼虫在热冲击下脂肪体组织中GSH含量及相关抗氧化酶活性变化。结果表明:热冲击下,家蚕5龄幼虫脂肪体组织中GSH含量下降,GST和TPx活性随着温度升高而升高,GR活性则无显著变化。总体来说,热冲击诱导了家蚕体内抗氧化酶活性的升高,使得家蚕的抗氧化防御系统能力不断增强。热冲击未诱导GR抗氧化能力的提升,可能在抵抗高温胁迫对家蚕造成的氧化损伤方面,TrxR起到主导作用。3、研究了热冲击对家蚕5龄幼虫脂肪体组织中BmPrx和BmTPx基因的转录水平的影响。结果表明:热冲击下,家蚕5龄幼虫脂肪体组织中BmPrx基因和BmTPx基因转录水平均有上调,与酶活性的变化具有一致性。BmPrx基因与BmTPx基因相比,BmPrx基因的转录水平显著高于BmTPx基因,且热冲击下,BmPrx基因的转录水平上升程度显著高于BmTPx基因的转录水平。通过对抗氧化酶在家蚕抗热冲击中的作用的探讨,可以为培育家蚕抗逆性新品种提供参考。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 热冲击对昆虫的影响
• 1.1 热冲击对昆虫生长发育的影响
• 1.2 热冲击对昆虫生殖的影响
• 1.3 热冲击对昆虫存活率的影响
• 1.4 热冲击对昆虫影响的内在机理
• 1.5 热冲击对家蚕的影响
• 2 活性氧代谢在热冲击影响中的作用
• 2.1 超氧化物歧化酶
• 2.2 过氧化氢酶
• 2.3 谷胱甘肽及其相关酶类的研究现状
• 3 实时荧光定量PCR（Real-time qPCR）技术
• 3.1 Real-time qPCR 实验原理
• 3.2 Real-time qPCR 的种类
• 第二章 研究内容与实验方法
• 1 研究内容
• 2 主要仪器设备
• 3 实验方法
• 3.1 样品酶液的制备
• 3.2 蛋白质含量测定
• 3.3 SOD 活性测定
• 3.4 CAT 活性测定
• 3.5 GSH 含量测定
• 3.6 GST 活性测定
• 3.7 GR 活性测定
• 3.8 TPx 活性测定
• 3.9 Real-time qPCR
• 第三章 热冲击对不同抗性家蚕品种五龄幼虫组织中抗氧化酶活性的影响
• 1 实验材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 高温处理
• 1.3 酶活性测定
• 1.4 实验数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 热冲击对不同家蚕品种5 龄幼虫死亡率的影响
• 2.2 热冲击对不同家蚕品种5 龄幼虫脂肪体组织中SOD 活性的影响
• 2.3 热冲击对不同家蚕品种5 龄幼虫脂肪体组织中CAT 活性的影响
• 2.4 热冲击对不同家蚕品种5 龄幼虫脂肪体组织中GST 活性的影响
• 2.5 热冲击对家蚕5 龄幼虫丝腺及中肠组织中GST 活性的影响
• 3 讨论
• 第四章 热冲击对家蚕五龄幼虫脂肪体组织中谷胱甘肽代谢的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 高温处理
• 1.3 家蚕5 龄幼虫脂肪体组织中GSH 含量及相关抗氧化酶活性的测定
• 1.4 家蚕5 龄幼虫脂肪体组织中BmPrx 和BmTPx 基因转录水平的测定
• 2 结果与分析
• 2.1 热冲击对家蚕5 龄幼虫脂肪体组织中GSH 含量及相关抗氧化酶活性的影响
• 2.2 热冲击对家蚕5 龄幼虫脂肪体组织中BmPrx 和BmTPx 基因转录水平的影响
• 3 讨论
• 第五章 小结与展望
• 参考文献
• 研究生期间发表的文章、专利
• 参加课题
• 附录
• 致谢