骨灵片对骨质疏松大鼠腰椎体视学及生物力学的影响

论文摘要

研究背景:骨质疏松症（osteoporosis,OP）是以骨量减少、骨微结构退行性改变和骨力学强度减弱,导致骨折发生的危险性增加为主要特征的一种全身代谢性骨骼疾病。中药复方通过多靶点的整体调节,对骨质疏松症的治疗具有优势。骨灵片（GuLing Pian,GLP）是依据祖国医学对骨质疏松症的认识,以“滋肾阴,补肾阳”为大法,针对骨质疏松症“肾虚为主,多虚多瘀”的病机特点组方,具有补肾壮骨、活血通络、阴阳双补功用,应用于临床多年,对骨质疏松症患者有良好确切疗效。本实验将通过观察GLP对骨质疏松大鼠模型的骨形态计量学、三维体视学以及生物力学改变,研究其对于骨强度的影响,并进一步探讨GLP治疗骨质疏松症的机理,为临床研究抗骨质疏松药物提供科学依据。目的:观察GLP对骨质疏松大鼠模型的骨形态计量学、三维体视学以及生物力学改变,研究其对于骨强度的影响,并进一步探讨GLP治疗骨质疏松症的机理。方法:1.骨灵片液根据骨灵片处方提取工艺提取有效成分,过滤浓缩为终浓度为1g生药/ml,由南方医科大学中医药学院中药制剂室提供。2.选用3月龄Sprague-Dawley（SD）系SPF级雌性大鼠36只,体重210—240g,由南方医科大学实验动物研究中心提供（检测合格证号1802208）。预先对试验动物进行编号:1,2,3,……34,35,36。通过查看随机数字表的方法,单盲随机分为6组。分别为空白对照组（即假手术组,A组）、去卵巢组（B组）、骨灵片低（C组）、中（D组）、高剂量组（E组）、雌激素对照组（F组）,每组各6只。分别给予生理盐水、骨灵片高、中、低剂量、雌激素灌饲3个月。3.采用去除卵巢的方法,建立雌性骨质疏松大鼠模型。4.术后正常饲养满1月后开始给药,给药前称量各组大鼠体重,根据体重换算给药剂量,各组大鼠均等体积给药,空白对照组和模型组均予生理盐水灌服,雌激素对照组给予30μg/Kg·d的17α-炔雌醇灌饲。骨灵片组以临床等效剂量为准,根据人鼠剂量换算标准,以高（3.54 g.kg-1.d-1）、中（2.66 g.kg-1.d-1）、低（1.77 g.kg-1.d-1）剂量,各组大鼠每日灌胃1次,共喂服3个月。5.应用骨组织形态计量学,对骨质疏松大鼠第三腰椎二维平面的动、静态参数进行测量。6.各组随机选取3个标本在二维基础上利用连续切片摄像及图像数码处理技术重建腰椎骨小梁的空间结构,结合计算机3D-Doctor软件测量相关三维参数。7.各组取第4腰椎进行生物力学凹入试验,检测其松质骨的最大载荷和刚度。8.统计分析:所有数据以（?）±s表示,用SPSS11.5统计软件进行方差分析,如果数据符合正态分布,用one-way ANOVA检验不同组间有无显著差异。如果方差齐性,用LSD法比较不同组间差异,如果方差不齐,则用Welch检验,多组间用Dunnett’sT3比较分析。相关分析采用多变量偏相关分析法,两组间比较用配对T检验。P＜0.05有显著性差别。结果:1.去势后的模型组较之假手术组,骨小梁分离度、骨形成率、骨矿化沉积率、每毫米破骨细胞数显著升高,骨小梁面积百分数、体积百分数、厚度、数量、体元总数、刚度和最大载荷均显著下降;2.骨形态计量学结果显示:经过不同剂量的骨灵片治疗后,各剂量组和雌激素对照组骨小梁分离度均有显著下降;中高剂量组和雌激素组骨小梁面积百分数、厚度和数量显著升高。中剂量组的骨小梁厚度比雌激素对照组有显著增加。去卵巢组与假手术组比较可见,各动态参数均显著升高。各剂量骨灵片组和雌激素组与去卵巢组比较,BFR/BS、BFR/BV、Oc.N/mm显著降低,骨灵片中剂量组的BFR/TV和中高剂量组的MAR减少具有显著差异。骨灵片治疗组与雌激素对照组比较,中高剂量组在动态参数上差异没有显著性。3.三维重建后的结果显示,经治疗后,雌激素对照组、骨灵片各剂量组的体元总数以及骨灵片中、高组的骨小梁体积百分数较之于模型组有显著增高,且高剂量组的体元总数增加较雌激素对照组显著。4.相关分析显示三维体元总数及骨小梁体积百分比与二维骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量呈显著正相关,与骨小梁分离度呈显著负相关。三维重建前后的骨小梁体积百分数无显著差异;5.生物力学上,经过不同剂量的骨灵片治疗后,雌激素组和骨灵片各剂量组刚度以及骨灵片中高剂量组的最大载荷较之于去卵巢组均有显著升高。与雌激素对照组比较,高剂量组在最大载荷上改善具有显著差异。结论:补肾中药骨灵片具有降低骨转换的作用,可以显著增加骨小梁的厚度,提高紧密性,改善骨小梁空间实际结构并显著增加腰椎的生物力学强度。提示骨灵片可以通过对骨小梁结构的改善,提高骨强度,增强骨对抗外力负荷的能力,起到抗骨质疏松的作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 骨灵片对骨质疏松大鼠腰椎形态计量学的影响
• 1 材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第二章 骨灵片对骨质疏松大鼠腰椎体视学的影响
• 1 材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第三章 骨灵片对骨质疏松大鼠腰椎生物力学的影响
• 1 材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 中英文缩略词对照表
• 综述
• 硕士期间成果
• 致谢
• 研究生毕业论文统计学审稿证明