论文摘要
目的观察糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏nephrin、VEGF的表达,研究绞股蓝总皂苷对DN大鼠肾脏nephrin、VEGF表达的影响,探讨绞股蓝总皂苷降低尿蛋白、保护肾脏的机理。方法60只清洁级雄性SD大鼠随机选取50只,采用单侧肾切除加STZ注射法改良复制DN模型。按血糖随机分为5组,每组10只：即绞股蓝总皂苷高剂量组（A组：1g/kg）、绞股蓝总皂苷中剂量组（B组：0.5g/kg）、绞股蓝总皂苷低剂量组（C组：0.25g/kg）、缬沙坦对照组（D组：8mg/kg）、模型对照组（E组：予等体积0.9%生理盐水灌胃）。其余10只作为正常对照组（F组：予等体积0.9%生理盐水灌胃）。药物干预4周后检测肾功能、24小时尿量、24h尿蛋白、肾脏肥大指数,电镜观察肾小球超微结构改变,RT-PCR和免疫组化分别检测nephrin、VEGF mRNA基因和蛋白的表达。结果1.与F组比较：各组大鼠足细胞足突融合甚至缺失,基底膜明显增厚；nephrinmRNA和蛋白表达水平明显减少（p<0.01）,VEGF表达明显增加,颜色加深且数量增多（p<0.01）；24h尿量、尿蛋白、血肌酐、尿素氮、肾脏肥大指数均明显升高,差异具有显著性（P<0.05）；2.与E组比较,（1）各治疗组均有不同程度的改善,足突增宽或部分融合,基底膜增厚情况减轻；nephrin mRNA和蛋白表达水平明显上调（P<0.01）, VEGF表达明显抑制（P<0.05）,且A、D组效果明显优于C组（P<0.01）,A、D组之间无差异（P>0.05）。（2）A、D组能显著减少DN大鼠24h尿量、尿蛋白（P<0.01）,降低血肌酐、尿素氮（P<0.05）,减轻肾脏肥大情况（P<0.05）,A、D组之间无差异（P>0.05）。C组在上述指标上与E组无差异（P>0.05）。3.24h尿蛋白与nephrin mRNA和蛋白的表达存在负相关（r=-0.685,P<0.01；r’=-0.667,P’<0.01）；24h尿蛋白与VEGF mRNA和蛋白的表达存在正相关（r=0.684, P<0.01; r’=-0.621, P’<0.01）; nephrin和VEGF mRNA和蛋白表达存在负相关（r=-0.852,P<0.01；r’=-0.872,P’<0.01）。结论1.DN大鼠存在足细胞结构和功能的损伤,且足细胞损伤在尿蛋白发生发展中起重要作用；2.绞股蓝总皂苷可能通过上调足细胞相关分子nephrin（?）勺表达,抑制足细胞分泌的VEGF的过表达,减轻足细胞超微结构的改变,从而保护肾脏,降低尿蛋白；3.不同剂量的绞股蓝总皂苷存在差异,高剂量组作用明显优于低剂量组,且效果与缬沙坦类似。