论文摘要
实验目的：观察脂质体介导的RhoB转染对人结肠癌细胞HCT116的影响,为结肠癌的临床治疗提供新的思路。实验方法：本实验以人结肠癌细胞HCT116为研究对象。实验共分五组：RhoB蛋白过表达组（pcDNA4-RhoB组）及其阴性对照组（pcDNA4-EGFP组）,RhoB蛋白干扰组（pGenesil-1-RhoB组）及其阴性对照组（pGenesil-1-HK组）,空白对照组（HCT116组）。将质粒（pcDNA,-RhoB、pcDNA4-EGFP、pGenesil-1-RhoB、pGenesil-1-HK）通过脂质体转染法导入HCT116细胞中,通过荧光显微镜下观察转染效果并计算转染效率；通过Western-Blot免疫印迹法检测各组细胞中RhoB蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡。实验结果：（1）荧光显微镜下观察到绿色荧光,显示脂质体成功将质粒转入结肠癌HCT116细胞中。转染平均效率约为82.4%（2）Western-Blot检测各组细胞中RhoB蛋白的表达,结果显示：pcDNA4-RhoB组RhoB蛋白的表达明显高于其他组,差异具有统计学意义（P<0.05）。pGenesil-1-RhoB组RhoB蛋白表达与HCT116组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。（3）MTT法结果显示：从第二天开始,与pcDNA4-EGFP组哈HCT116组相比,pcDNA4-RhoB组细胞增殖明显受抑制,差别有统计学意义（P<0.05）。（4）细胞凋亡结果显示：pcDNA4-RhoB组、pcDNA4-EGFP组、HCT116组凋亡率分别为17.53±0.71%、5.23±0.42%、4.67±0.55%。pcDNA4-RhoB组明显高于pcDNA4-EGFP组及HCT116组,差别有统计学意义（P<0.05）。结论：RhoB蛋白过表达可抑制结肠癌细胞HCT116增殖活性,并能促进其凋亡。它可能为结肠癌提供新的治疗思路。