CTN986动物体内代谢与药物动力学研究

论文摘要

槲皮素-3-O-β-D-呋喃芹菜糖-（1→2）-[α-L-吡喃鼠李糖-（1→6）]-β-D-吡喃葡萄糖苷，代号CTN986，是我室从无毒棉花籽中分离得到的具有抗抑郁活性的黄酮苷类化合物。该化合物对5HT1A受体有特异性结合，在小鼠强迫游泳实验中表现出良好的抗抑郁活性，是一个潜在的抗抑郁药（获国家发明专利，专利号：ZL99 1 20216．3；已申请美国发明专利）。由于测定方法等方面的限制，黄酮苷的体内吸收问题多年来一直是争论的焦点。CTN986的高极性和强亲水性，使得其在体内代谢和药物动力学过程研究对于现有的分析方法是一种挑战。本论文目标是利用先进的分析手段，研究CTN986在动物体内的代谢和药物动力学过程，主要工作如下： 一、定量分析方法的建立 建立了测定动物血清、组织、胆汁、尿和粪样品中CTN986及其次级苷芦丁、陆地棉苷和苷元槲皮素的LC／MS／MS分析方法，并应用本法对CTN986在动物体内的代谢和药物动力学进行了研究。 CTN986、芦丁和陆地棉苷的检测：生物样品经固相萃取后，以甲醇-异丙醇-水-甲酸（20：10：70：0．1，v／v）为流动相，采用Zorbax C8柱分离，电喷雾串联四极杆质谱检测。在正离子条件下通过多反应监测（MRM）方式进行扫描，分别选取待测物和内标的母离子进行二级质谱分析，所得碎片离子（CTN986：m／z 743.4→303.1，芦丁：m／z 611.2→303.1，陆地棉苷：m／z 465.2→303.3和CTN987（内标）：m／z 727.3→287.1）的色谱峰面积比用于定量分析。 槲皮素的检测：槲皮素和CTN986极性相差较大，因此选择了有机溶剂配比更高的流动相对槲皮素进行检测；另外槲皮素在负离子条件下的灵敏度高于正离子，因此选择在负离子条件下对其进行检测。生物样品经固相萃取后，以乙腈-甲醇-异丙醇-水-甲酸（20：16：8：56：0.08，v／v）为流动相，Zorbax C8柱分离，用于定量分析的离子反应为m／z 301→151（槲皮素）和m／z 725→285（CTN987，内标）。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 新药开发中药物代谢与药物动力学研究的意义
• 1.2 液相色谱-质谱联用技术在药物研究中的应用
• 1.3 CTN986研究背景和概况
• 1.4 本论文的研究目的及方案
• 第二章 电喷雾-串联质谱技术在黄酮类化合物结构分析中的应用
• 2.1 材料和方法
• 2.2 结果和讨论
• 第三章 生物样品中CTN986及其次级苷和苷元定量分析方法的建立
• 3.1 生物样品中 CTN986、芦丁和陆地棉苷定量分析方法
• 3.1.1 血清样品中CTN986、芦丁和陆地棉苷分析方法
• 3.1.1.1 仪器与条件
• 3.1.1.2 分析方法确证
• 3.1.1.3 未知样品分析
• 3.1.2 组织样品中CTN986分析方法
• 3.1.3 胆汁样品中CTN986分析方法
• 3.1.4 尿样中CTN986分析方法
• 3.1.5 粪样中CTN986分析方法
• 3.1.6 讨论
• 3.1.6.1 质谱条件的优化
• 3.1.6.2 色谱条件的选择
• 3.1.6.3 提取方法的确定
• 3.1.6.4 内标的选择
• 3.1.6.5 基质效应的考察
• 3.2 生物样品中槲皮素分析方法
• 3.2.1 粪样中槲皮素分析方法
• 3.2.2 结果与讨论
• 第四章 CTN986在小鼠体内的药物动力学研究
• 4.1 CTN986在小鼠体内的吸收动力学
• 4.1.1 实验设计
• 4.1.2 血药浓度及药动学参数
• 4.2 CTN986在小鼠体内的组织分布
• 4.2.1 实验设计
• 4.2.2 组织分布结果
• 4.3 小结
• 第五章 CTN986在大鼠体内的药物动力学研究
• 5.1 CTN986在大鼠体内的吸收动力学
• 5.1.1 实验设计
• 5.1.2 血药浓度及药动学参数
• 5.2 CTN986在大鼠体内排泄实验
• 5.2.1 实验设计
• 5.2.2 药物的排泄实验结果
• 5.2.2.1 静脉给药后 CTN986在胆汁、尿和粪中的排泄
• 5.2.2.2 口服给药后 CTN986在胆汁、尿和粪中的排泄
• 5.3 小结
• 第六章 CTN986在鼠体内的代谢研究
• 6.1 CTN986在鼠体内主要代谢产物 M1的分析鉴定
• 6.2 M1在生物样品中的半定量分析
• 6.2.1 组织样品中M1的半定量分析结果
• 6.2.2 排泄样品中M1的半定量分析结果
• 6.2.2.1 静脉给药后 M1在胆汁、尿和粪中的排泄
• 6.2.2.2 口服给药后 M1在胆汁中的排泄
• 第七章 实验部分
• 7.1 药品与试剂
• 7.2 仪器与设备
• 7.3 溶液配制
• 7.3.1 标准系列溶液配制
• 7.3.2 其他溶液配制
• 7.4 实验动物
• 7.5 生物样品的采集
• 7.5.1 小鼠体内吸收动力学实验给药方案及样品采集
• 7.5.2 小鼠体内组织分布实验给药方案及样品采集
• 7.5.3 大鼠体内吸收动力学实验给药方案及样品采集
• 7.5.4 大鼠体内排泄实验给药方案及样品采集
• 7.6 CTN986药物代谢和动力学研究数据
• 7.6.1 方法确证数据
• 7.6.2 血清药物浓度数据
• 7.6.3 胆汁中药物累积排泄量数据
• 7.6.4 尿粪中药物累积排泄量数据
• 第八章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历
• 附发表文章