黄山风景区常绿阔叶树生齿裂菌属分类学研究及该属种间遗传多样性分析

论文摘要

黄山风景区是国家重点风景区，位于安徽省南部，该区气候温和、雨量充沛、地形复杂，适宜众多植物生长繁衍，齿裂菌属各种分布也相当广泛。本文采用较新颖、先进的真菌分类体系和多性状综合分类方法，从形态解剖、个体发育、生态及地理分布等方面，对黄山风景区常绿阔叶树生齿裂菌属进行了较系统的分类研究。同时采用ITS序列分析方法对齿裂菌属18个菌株进行了种间遗传多样性的研究，确定了部分形态学特征以及寄主种类差异在该类真菌种水平分类上的重要性，进一步弄清了该属种间的亲缘关系及遗传差异。本文以Sherwood（1980）、Johnston（1986）、Spooner（1990）、Kirk et al.（2008）等人提出的若干分类原则为主要依据，对采自黄山风景区和安徽农业大学森林菌物标本室（AAUF）保藏的黄山地区常绿阔叶树上的齿裂菌属种的标本进行分类、鉴定。共查明13个种，即青冈齿裂菌Coccomyces cyclobalanopsis、三角形齿裂菌C. delta、黄山齿裂菌C. huangshanensis、八角生齿裂菌C. illiciicola、小齿裂菌C. leptideus、显缘齿裂菌C. limitatus、大齿裂菌C. magnus、极小齿裂菌C. minimus、尖丝齿裂菌C.mucronatus、多角齿裂菌C. multangularis、隐齿裂菌C. occultus、中国齿裂菌C. sinensis和山矾齿裂菌C. symploci。其中极小齿裂菌Coccomyces minimus为一新种。各种均附有形态学特征描述、图解、寄主及生境的记载，并加以讨论。编制了二叉式分种检索表。本文亦通过组织分离法对来自黄山风景区、天堂寨国家森林公园、万佛山国家森林公园的齿裂菌活材料进行分离培养，共获得13个纯菌株。对各菌株进行DNA提取与检测、rDNA-ITS区PCR扩增和序列测定。同时结合GenBank中5个C. australis的菌株序列，用分析软件MEGA4.1进行碱基含量分析。统计结果表明，齿裂菌属各菌株ITS序列长度为436-457bp，G+C含量为48.0%-51.6%；ITS序列长度与G+C含量在种内变化较小，种间变化较大，这说明该属种间遗传多样性比种内遗传多样性丰富。利用PAUP*4.0b4a软件中的最大简约法（maximum parsimony method，MP）构建18个菌株的系统发育树，共形成了两个独立进化的分支I和II，此结果也支持了依据形态学等表型性状的分类。通过分析系统树及形态学上的差异，结果表明，寄主种类对齿裂菌属种间遗传变异会产生很大影响，而与产地并无明显关联。因此，采用ITS序列分析可以作为区分齿裂菌属种的一种有效方法。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• Ⅰ 文献综述
• 1 黄山风景区自然地理概况
• 2 常绿阔叶树的分布及其经济利用价值
• 3 齿裂菌属分类的研究历史与现状
• 4 齿裂菌属的形态学特征
• 5 齿裂菌属的生态与地理分布
• 6 分子生物学技术在菌物研究方面的应用
• Ⅱ 引言
• Ⅲ 黄山风景区常绿阔叶树生齿裂菌属的分类
• 1 材料与方法
• 1.1 标本采集与整理
• 1.2 实验仪器
• 1.3 显微检查
• 1.3.1 外部特征观察
• 1.3.2 切片显微检查
• 1.3.3 描述及拍照
• 2 属的特征
• 2.1 齿裂菌属
• 2.2 分种检索表
• 3 种的描述
• 3.1 极小齿裂菌（新种）
• 3.2 青冈齿裂菌
• 3.3 三角形齿裂菌
• 3.4 黄山齿裂菌
• 3.5 八角生齿裂菌
• 3.6 小齿裂菌
• 3.7 显缘齿裂菌
• 3.8 大齿裂菌
• 3.9 尖丝齿裂菌
• 3.10 多角齿裂菌
• 3.11 隐齿裂菌
• 3.12 中国齿裂菌
• 3.13 山矾齿裂菌
• Ⅳ 齿裂菌属种间遗传多样性的 ITS 序列分析
• 1 材料与方法
• 1.1 供试菌株及其来源
• 1.1.1 实验主要仪器设备
• 1.1.2 实验主要培养基
• 1.1.3 实验主要药品、试剂及配制
• 1.2 方法
• 1.2.1 菌丝培养及 DNA 提取
• 1.2.2 ITS1-5.8S rDNA-ITS2 区特异性 PCR 扩增与序列测定
• 1.2.3 数据处理
• 2 结果与分析
• 2.1 各菌株 ITS 序列的长度和碱基含量
• 2.2 系统发育树的构建与分析
• Ⅴ 结论
• Ⅵ 讨论
• 1. 关于齿裂菌属的分类研究问题
• 2. 黄山风景区常绿阔叶树上齿裂菌分布较广泛的原因
• 3. rDNA-ITS 技术对齿裂菌属种间关系分析的适用性
• 参考文献
• 图版 Ⅰ
• 图版 Ⅱ
• 图版 Ⅲ
• 致谢
• 个人简介