论文摘要
第一部分小檗碱对高糖高脂诱导的胰岛NIT-1细胞凋亡的影响目的探讨小檗碱对高脂高糖诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法,在培养基中加入高糖高脂及小檗碱共同培养24 h后,比较不同浓度的小檗碱对体外培养及高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞活力的影响;AnnexinV/PI双标记法流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果培养基中加入高糖高脂及小檗碱共同培养24 h后,MTT结果显示,模型组的细胞抑制率明显高于正常组（P < 0.01）,各小檗碱组能从不同程度上减轻高糖高脂对细胞的生长抑制（P < 0.01）。AnnexinV/PI双标记法流式细胞术结果表明,与正常对照组相比,模型组NIT-1细胞凋亡率明显升高（P < 0.0 1）;与模型组相比,小檗碱组NIT-1细胞凋亡率明显降低（P < 0.01）。结论小檗碱有改善高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的作用。第二部分小檗碱改善高糖高脂诱导的胰岛NIT-1细胞凋亡的分子机制目的观察小檗碱对高脂高糖诱导NIT-1胰岛β细胞凋亡的改善情况,探讨小檗碱抗胰岛β细胞凋亡的分子机制。方法培养基中加入高糖高脂及小檗碱共同培养NIT-1细胞24 h后,采用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达水平;免疫荧光法检测Caspase-3表达。结果与正常对照组相比,Bcl-2 mRNA表达显著降低（P < 0.01）,而Bax和Caspase-3 mRNA表达明显增高（P < 0.01）,且胞浆Caspase-3表达增加;与模型组相比,Bcl-2 mRNA表达增高（P < 0.01）,而Bax和Caspase-3 mRNA表达降低（P < 0.01）,小檗碱组胞浆Caspase-3表达亦降低。结论小檗碱抑制高糖高脂诱导NIT-1细胞的凋亡可能与其激活Bcl-2和抑制Bax和Caspase-3的表达有关。
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