论文摘要
本论文建立了RP-HPLC分析颗粒酒花中α-和β-酸的3种主要异构体的方法。样品经预处理,色谱条件为色谱柱:EC 250/4 Nuclesoil,100-5 C18。保护柱:CC 8/4 Nuclesoil100-5 C18。梯度洗脱,流动相A:乙腈:甲醇:Tris buffer(20 mmol/L)为17:25:57(v/v/v);流动相B:乙腈:甲醇:Tris buffer(20 mmol/L)为50:8:42(v/v/v),流速0.55 mL/min,柱温40℃,检测波长314 nm。外加标回收率95.7%和97.8%;变异系数为1.03和1.11%;检出限为0.21和0.28 mg/L。方法线性良好、简便、准确。利用上述HPLC方法考察了酒花自然和强制老化过程中α-和β-酸3种主要异构体含量的变化。加葎草酮和蛇麻酮含量在α-和*β-酸总量中占的比例较少且在老化过程中变化很小。提出了酒花老化指数(HAI)的概念,通过与酒花劣化度和HSI值的比较,表明HAI值既能弥补HSI值不能评价香花的缺陷,也能弥补酒花劣化度测定方法重现性和准确性差的缺点。本文使用相同的色谱柱又建立了RP-HPLC方法测定酒花、酒花制品以及啤酒中的4种异构化α-酸的方法。色谱条件为流动相:甲醇:水:磷酸(85%):EDTANa2(0.1 mol/L)为750:240:10:1(v/v/v/v),流速1 mL/min,柱温35℃,检测波长270 nm,进样体积10μL。方法精密度为1.09-1.86%,4种异构化α-酸的回收率在91.3%-98.0%之间。方法线性良好、精确、灵敏。对不同种类的香型和苦型酒花对啤酒苦味的影响进行了研究。苦型酒花酿造啤酒中异合α-酸和异α-酸占总酸量的88%以上,而香型酒花酿造啤酒中主要是异α-酸,占55%左右。提出了计算苦味值(CBU)的概念,可以通过HPLC测定的异α-酸3种主要异构体的含量来计算出啤酒的苦味值,此方法较传统方法更准确、重现性更高。
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