通络方药对链脲佐菌素所致高血糖及β-细胞损伤的保护

论文摘要

糖尿病是一种常见且严重的疾病。糖尿病的微血管病变是导致病人失明,晚期肾功能衰竭以及各种神经退行性病变的主要原因。糖尿病使供应心脏,大脑以及下肢血液的大动脉硬化加剧,结果糖尿病人患心肌梗塞,中风以及截肢的机率明显增加。流行病学调查显示,到2010年,全世界糖尿病人将达到3个亿。因此,如何减少糖尿病及其并发症带来的沉重的医疗及社会经济负担不仅是发展中国家面临的问题,对于发达国家也同样是一个巨大的挑战。氧化应激在糖尿病以及糖尿病并发症的发生发展中起着至关重要的作用。高血糖使线粒体内超氧阴离子生成过多,导致多元醇通路激活,蛋白质非酶糖化增加,PKC通路激活以及己糖胺途径激活,这些通路的激活引起急性内皮功能紊乱,最终导致糖尿病微血管病变以及大血管病变的发生发展。研究表明,抗氧化剂治疗能减轻实验动物模型体内以及人体内的氧化应激指标。与降糖治疗相比,抗氧化剂治疗安全价廉（如胰岛素强化治疗每年每例患者需花费1600美金）,抗氧化剂治疗因而成为世界范围内一种有效的,切实可行的治疗措施。链脲佐菌素（STZ）特异破坏胰岛β细胞,因而被广泛用于诱发实验性糖尿病。人们普遍认为活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）是STZ导致啮齿类胰岛损伤的首要因素。STZ在胰岛内引起超氧阴离子及羟自由基堆积,刺激过氧化氢的产生,因而介导β细胞核DNA碎裂并最终导致β细胞坏死。褪黑素是强有力的抗氧化剂,同时褪黑素还能调节抗氧化酶以及促氧化酶活性并能控制抗氧化酶以及促氧化酶基因表达。褪黑素的脂溶性使其极易进入细胞及所有的亚细胞内,并能进入细胞核内发挥其抗氧化损伤的效应。实验表明,褪黑素能降低STZ诱发的高血糖水平,并能降低肝脏,肾脏以及胰腺等组织内氧化应激水平,后者与血糖高低无关。通络方药（TLR）由人参,水蛭,全蝎,蜈蚣,土鳖虫,蝉蜕,赤芍等组成。据报道通络方药能有效地降低血浆中总胆固醇以及甘油三酯水平,改善微循环。我们既往的研究表明,通络方药通过降低血浆中以及组织中氧化应激水平发挥其对糖尿病大鼠周围神经（12）,肾脏（13）以及大血管内皮细胞（14）的保护作用。目前,我们的研究旨在探究通络方药是否能有效地阻止STZ诱发的糖尿病,并与褪黑素的作用进行比较。本课题主要研究材料和方法雄性SD大鼠随机分为四组,正常对照组（NC,n=10）;STZ组（STZ,n=10）;通络方药+STZ组（TLR+STZ,n=10）褪黑素+STZ组（MLT+STZ）。链脲佐菌素（STZ）70 mg/kg体重腹腔注射,通络方药（1.0g/kg体重/天,强饲）及褪黑素（200μg/kg/day）在STZ注射前八天开始给予至实验结束。实验期限为四周。观测实验期间各组糖尿病发生率及血糖的动态变化,实验结束时取大鼠胰腺行MDA水平及GSH-Px活性测定,免疫组化方法检测β细胞功能。本课题主要结果三组不同来源的证据表明,通络方药以及褪黑素能有效地阻止STZ诱发的糖尿病的发生发展。首先,通络方药和褪黑素使STZ诱发的糖尿病的发生率降低并降低STZ诱发的高血糖水平（p＜0.05 vs STZ）;其次,STZ使大鼠胰腺组织内MDA含量明显升高,GSH水平降低.通络方药以及褪黑素能逆转STZ引起的变化（p＜0.05 vs STZ）,通络方药作用较褪黑素略强;最后,免疫组化结果显示,STZ使胰岛内胰岛素抗体染色明显减弱,通络方药以及褪黑素使胰岛内胰岛素抗体染色明显增强（p＜0.0001 Vs STZ）。本课题主要结论中药复方制剂通络方药和已知的强效抗氧化剂褪黑素一样能通过减少胰腺组织内氧化应激水平有效防止链脲菌素诱发的高血糖以及β细胞的损伤,通络方药的疗效较褪黑素略强。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 主要英文缩写
• 前言
• 第一部分 链脲佐菌素对大鼠血糖,体重的影响以及通络方药,褪黑素的干预研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 通络方药,褪黑素对链脲佐菌素引起的大鼠胰腺组织内氧化应激生化指标改变的影响
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分 通络方药及褪黑素对STZ导致的胰岛β细胞及亚细胞结构和功能改变的影响
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 综述
• 参考文献
• 致谢