甲醛对小鼠肝的DNA损伤

论文摘要

近年来,室内装修引发的环境污染问题受到了普遍关注。在众多的污染物中,甲醛以其来源广、毒性大、污染水平高、污染时间长等特点,已成为我国最主要的室内空气污染物之一,也是环境卫生领域研究的热点和难点。本课题探讨了甲醛致小鼠肝的DNA损伤作用,藉以探讨甲醛的遗传毒性效应及其机制,为人群健康监测提供早期灵敏的生物效应标志物。研究实验结果如下: 1.气态甲醛致小鼠肝的DPC效应及其修复 本研究分别以不同剂量的气态甲醛作为染毒剂对小鼠进行染毒,并且用KCl—SDS沉淀法检测了染毒后小鼠肝的DPC含量。经浓度为0.5mg/m~3、1.0mg/m~3和3mg/m~3的气态甲醛染毒后,测量小鼠的肝细胞的DPC含量。结果显示经0.5mg/m~3气态甲醛染毒处理后,小鼠肝细胞的DPC系数与对照组相比没有发生显著的变化;但是,当甲醛浓度升高到1.0mg/m~3和3.0mg/m~3时,DPC系数显著上升,且与对照组相比有显著性差异(p<0.01)。该结果说明气态甲醛在低浓度时,不能诱导DPC的形成或者不能显著诱导DPC的形成,在较高浓度时能够显著诱导DPC的形成,且具有明显的量效关系。修复实验结果显示,经过3.0mg/m~3的气态甲醛染毒后,0h组肝细胞内DPC含量与空白组相比明显增加(p<0.01),经过6h修复后,与0h修复组相比有显著性下降(p<0.01),但与空白组相比,此时DPC还没有修复完全;经过12、18和24h修复后,DPC含量与0h相比有极显著的下降,24h时DPC含量与空白组相比无显著差异,但12和18h时DPC含量比空白组更低,且有显著差异。由此可知,气态甲醛诱导生成的DPC在体内修复较快,在12h内基本上可以修复完全,24h内可以恢复至机体正常水平。 2.液态甲醛致HepG2细胞的DPC效应及其修复 本研究分别以不同剂量的液态甲醛作为染毒剂,对人肝癌细胞系HepG 2细胞进行染毒,并且用KCl—SDS沉淀法检测了染毒后HepG 2细胞的DPC含量。结果显示在经25μmol/L和50μmol/L液态甲醛处理后,HepG 2细胞内的DPC系数虽然稍有变化,但是与空白对照组相比无显著差异。而当甲醛浓度上升至75μmol/L及以上时,染毒后细胞中的DPC系数出现了极显著上升(p<0.01)。该结果说明液态

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 一、文献综述
• 1. 甲醛的来源、污染现状及其污染特征
• 1.1 甲醛的来源
• 1.2 室内甲醛的来源及其污染现状
• 1.3 室内甲醛的污染特征
• 2. 甲醛的遗传毒性
• 2.1 甲醛导致 DNA断裂作用
• 2.2 甲醛导致 DNA-DNA交联
• 2.3 甲醛导致 DNA-蛋白质交联
• 3. 选题意义
• 二、材料与方法
• 1. 实验材料
• 1.1 实验受试动物
• 1.2 实验受试细胞
• 1.3 主要化学试剂
• 1.4 主要实验仪器
• 1.5 主要实验溶液的配制
• 2. 实验方法
• 2.1 气态甲醛致小鼠肝 DPC实验方案
• 2.2 气态甲醛致小鼠肝 DPC修复的实验
• 2.3 液态甲醛致人肝癌细胞系HepG 2DPC的实验
• 2.4 液态甲醛致人肝癌细胞系HepG 2DPC修复的实验
• 2.5 液态甲醛在不同时间段致小鼠肝 DPC效应
• 2.6 气态甲醛致小鼠肝 DNA损伤效应
• 三、实验结果
• 1. 染毒装置中气态甲醛释放规律
• 2. DNA浓度标准曲线
• 3. 气态甲醛致小鼠肝的DPC效应及其修复
• 3.1 气态甲醛致小鼠肝 DPC效应
• 3.2 气态甲醛致小鼠肝 DPC的修复
• 4. 液态甲醛致 HepG2细胞的 DPC效应及其修复
• 4.1 液态甲醛致人肝癌细胞系HepG 2DPC效应
• 4.2 液态甲醛致人肝癌细胞系HepG 2DPC的修复
• 5. 不同浓度的液态甲醛在不同时间段对小鼠肝 DPC的效应
• 5.1 0.2mg/kg液态甲醛在不同时间段对小鼠的DPC效应
• 5.2 2mg/kg液态甲醛在不同时间段对小鼠的 DPC效应
• 5.3 20mg/kg液态甲醛在不同时间段对小鼠的DPC效应
• 6. 甲醛吸入对小鼠肝细胞的DNA损伤作用
• 四、讨论
• 1. 人肝癌细胞系 HePGZ以及小鼠肝的应用
• 2. DPC检测方法—KCl-SDS沉淀法
• 2.1 KCl-SDS沉淀法的应用
• 2.2 KCl-SDS沉淀法的原理
• 3. 单细胞凝胶电泳实验
• 3.1 单细胞凝胶电泳实验原理
• 3.2 SCGE的技术评价
• 4. 甲醛致人肝癌细胞系 HepG 2以及小鼠肝 DNA损伤和 DPC效应
• 5. 甲醛的遗传毒性与职业卫生标准
• 6. 甲醛致人肝癌细胞系 HepG 2以及小鼠肝 DPC效应
• 7. 甲醛所致 DPC的修复作用
• 8. 甲醛致小鼠肝细胞 DNA断裂
• 9. 甲醛所致 DNA断裂的机制
• 10. 小结
• 五、结论
• 六、参考文献
• 致谢
• 附录一
• 附录二