盐酸美哌隆的脑内作用机制和药代动力学初步研究

论文摘要

精神分裂症是以基本个性改变,思维、情感、行为的分裂,精神活动与环境的不协调为主要特征的一类常见精神病。其发病率在15‰,随着社会的发展,竞争压力的增大,其发病率有明显的上升。氯丙嗪（chlorpromazine）等典型抗精神病药可以有效控制精神分裂症阳性症状,但其并非对所有病人都有效,且对阴性症状无能为力,特别是存在严重的锥体外系不良反应（60%）。与典型抗精神病药物相比,非典型抗精神病药物（Atypicalantipsychotic drugs,APDs）在临床上具有以下的优点:①没有传统的抗精神病药物所具有的副作用或较之轻微得多;②对阴性症状有效;③可改善患者的认知功能缺陷。目前在美国已有50%以上的患者接受APDs的治疗。1965年,Christensen等首先报道美哌隆是一个新型的丁酰苯类抗精神药。临床实践证明:美哌隆可改善精神分裂症阳性、阴性症状,对难治性精神分裂症有效,并可提高患者认知功能;锥体外系不良反应（EPS）及迟发型运动障碍（TD）较少,且不会持久地引起催乳素升高。由于其药理作用不同于传统的丁酰苯类药物,如氟哌啶醇,近几年有人也认为其药理机制属于APDs,重新对其进行研究。APDs对不同脑区神经核作用具有相对特异性,如更明显地影响边缘叶和额叶皮质区神经化学活动。研究表明,精神分裂症的阴性症状和认知缺陷是由前额叶的多巴胺（DA）下降引起;中脑边缘DA系统中,伏核作为该通路的功能中心,可能是精神病治疗的重要靶点。精神分裂症病人的认知缺陷与皮质乙酰胆碱转移酶活性相关。本论文以大鼠脑内特定区域的DA和乙酰胆碱（ACh）水平作为药效学考察的指标,利用脑微透析采样技术,结合HPLC-ECD,HPLC-MS/MS检测技术测定内侧额叶前皮质（Medial prefrontal cortex,mPFC）和伏核（Nucleusaccumbens,NAC）内DA和ACh的含量,通过对脑内神经递质给药前后一段时间的动态监测和给药后脑内药物浓度的测定,考察药物对大鼠脑内多巴胺和乙酰胆碱释放的影响。结果表明,盐酸美哌隆剂量相关性的增加大鼠mPFC和NAC内DA释放;并可剂量相关性的增加mPFC内ACh释放,但对NAC内ACh不明显。盐酸美哌隆对mPFC内多巴胺水平较NAC影响大,与氯氮平等APDs作用一致。本论文建立了大鼠血浆内盐酸美哌隆固相萃取HPLC-UV测定方法,进行大鼠静脉和灌胃给药体内药代动力学研究。本方法灵敏度高、准确、简便,提取回收率达75%以上。盐酸美哌隆在血浆内的药代动力学呈剂量依赖型,静脉给药药物的药时曲线呈双峰现象,表明药物在体内存在肝肠循环。本论文建立了脑透析液中盐酸美哌隆的HPLC-UV测定方法。利用脑微透析技术取样,测定皮下给药后脑内盐酸美哌隆的浓度,通过考察药物浓度对脑内神经递质释放的影响,更直观地反映药物的作用机制和药效。研究表明,盐酸美哌隆皮下给药后可迅速透过血脑屏障,30min时即可检测。5和10 mg·kg-1给药后药物在脑内分布呈剂量相关性,表明药物对神经递质的影响与药物浓度相关,但两者达峰时并不一致,表明药物浓度并非神经递质变化的唯一决定因素,还应考虑受体分布、受体浓度和受体结合力等因素。同时测定灌胃给药后脑区内药物的药动学变化。血药浓度不能完全反映药物的脑内的浓度,药物在通过血脑屏障时可能存在饱和。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 第一章 前言
• 1.1 美哌隆的药理及临床研究进展
• 1.1.1 理化性质
• 1.1.2 药理作用
• 1.1.3 药代动力学
• 1.1.4 临床应用
• 1.1.5 不良反应
• 1.1.6 药物相互作用
• 1.1.7 小结
• 1.2 微透析采样技术的研究概况
• 1.2.1 微透析采样技术的特点
• 1.2.2 脑透析技术的影响因素
• 1.2.3 相对回收率的测定
• 1.3 神经递质的分析方法及研究进展
• 1.3.1 ACh的测定
• 1.3.2 DA的测定
• 1.4 本课题的研究内容、意义及创新点
• 第二章 盐酸美哌隆对大鼠特定脑区神经递质的影响
• 2.1 微透析试验方法
• 2.1.1 动物、试剂和仪器
• 2.1.2 溶液配制
• 2.1.3 脑内微透析取样试验过程
• 2.1.4 讨论
• 2.2 脑透析液中DA测定方法的建立
• 2.2.1 实验材料
• 2.2.2 溶液配制
• 2.2.3 DA色谱条件
• 2.2.4 DA分析方法学验证
• 2.2.5 讨论
• 2.2.6 DA探针回收率试验
• 2.3 脑透析液中ACh测定方法的建立
• 2.3.1 实验材料
• 2.3.2 溶液配制
• 2.3.3 色谱条件
• 2.3.4 质谱条件
• 2.3.5 ACh方法学验证
• 2.3.6 讨论
• 2.3.7 ACh探针回收率试验
• 2.4 样品测定
• 2.4.1 药液配制
• 2.4.2 分组给药
• 2.4.3 定量方法
• 2.5 结果与讨论
• 2.5.1 mPFC和 NAC中基线多巴胺和乙酰胆碱水平
• 2.5.2 盐酸美哌隆对神经递质的影响
• 2.5.3 盐酸美哌隆对mPFC和NAC内DA水平的影响
• 2.5.4 讨论
• 第三章 盐酸美哌隆大鼠体内药代动力学研究
• 3.1 材料、对象与方法
• 3.1.1 仪器
• 3.1.2 药品与试剂
• 3.1.3 实验动物
• 3.1.4 色谱条件
• 3.1.5 溶液配制
• 3.1.6 血样处理
• 3.2 分析方法学验证
• 3.2.1 色谱方法的专属性
• 3.2.2 标准曲线制备
• 3.2.3 提取回收率
• 3.2.4 精密度和方法回收率
• 3.2.5 稳定性考察
• 3.3 样品测定
• 3.3.1 药液配制
• 3.3.2 给药与样品采集
• 3.4 实验结果
• 3.5 讨论
• 3.5.1 血浆样品预处理方法
• 3.5.2 药液配制
• 3.5.3 药代动力学结果
• 第四章 大鼠特定脑区内盐酸美哌隆药代动力学研究
• 4.1 动物、试剂和仪器
• 4.1.1 实验动物
• 4.1.2 药物和试剂
• 4.1.3 仪器设备和材料
• 4.2 溶液配制
• 4.3 色谱条件
• 4.4 分析方法学验证
• 4.4.1 方法专属性
• 4.4.2 标准曲线制备
• 4.4.3 回收率与精密度
• 4.4.4 稳定性考察
• 4.5 探针回收率考察
• 4.5.1 流速对盐酸美哌隆探针回收率的影响
• 4.5.2 浓度对盐酸美哌隆探针回收率的影响
• 4.5.3 盐酸美哌隆探针回收率的日内稳定性
• 4.5.4 盐酸美哌隆体内探针回收率的测定
• 4.5.5 讨论
• 4.6 样品测定
• 4.6.1 药液配制
• 4.6.2 给药与样品采集
• 4.7 实验结果与讨论
• 4.7 1 平均血药浓度-时间曲线
• 4.7.2 药代动力学参数
• 全文总结
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士期间发表的论文及专著
• 学位论文评阅及答辩情况表