西瓜枯萎病生防细菌筛选及其防治作用的研究

论文摘要

西瓜枯萎病是西瓜的主要病害,严重影响西瓜的产量,本文从我国的西瓜生产实际出发,从连作的西瓜田块、黄瓜和茄子等园艺作物根际土壤和病健组织中分离筛选对西瓜枯萎病有防治效果的拮抗菌株,对拮抗菌株的温室防病效果、田间防效以及分类鉴定进行了研究,并初步研究了拮抗菌株的拮抗机理,以期通过生物学途径改良设施连作土壤和控制蔬菜土传病害提供依据。主要结果如下：（1）从内蒙古、新疆、安徽、河南、江苏、江西6省的西瓜、黄瓜和茄子3种作物根际土壤和病健组织中,共获得样本64份,分离得到细菌1055株,其中病土中分离出的最多。通过平板对峙培养,室内抑菌活性测定结果表明：9株细菌分离物对西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f. sp. niveum、甘蓝黑斑病菌Alternaria brassicicola、辣椒疫霉病菌Phytophthora capsici和番茄灰霉病菌Botrytis cinerea均具有很强的拮抗作用,其中菌株NBT-15和PL-82对西瓜枯萎病菌菌丝生长的抑制作用比较明显,抑制率分别为60.5%和55.3%。（2）根据上述结果选择9个生防细菌进行温室试验,结果表明：NBT-15和PL-82对西瓜枯萎病的防治效果分别为80.4%和75.6%。在田间试验中,NBT-15和PL-82两株菌的防治效果依然很好,防治效果分别为70.05%和50.43%,NBT-15的防治效果要大于B-916,它们不仅对西瓜枯萎病具有防治作用,并且能够促进西瓜的生长。（3）对筛选出的两株防病促生效果明显的菌株进行了拮抗机理的研究：结果表明,二者都能够分泌一些降解细胞壁的酶类,NBT-15能够产生纤维素酶和嗜铁素,而PL-82能够产生蛋白酶和嗜铁素,说明其产生的蛋白酶、纤维素酶、嗜铁素等在抗真菌上发挥了一定得作用。利用抗利福平标记法研究拮抗芽孢杆菌NBT-15在土壤及西瓜根部的定殖情况。结果表明,拮抗菌株NBT-15能够在土壤中定殖至少27天,但随着时间的延长土壤中定殖的拮抗细菌菌量呈下降趋势,而在西瓜根际菌量的下降则很缓慢。防治时需要在第15d时再加强浇灌一次该菌能起到很好的效果。（4）利用形态学鉴定、生理生化特性鉴定及细菌的16S rDNA序列分析结果相结合的方法,分别将菌株NBT-15和PL-82鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis和铜绿假。单胞菌杆菌Pseudomonas aeruginosa,基因库中两菌株的序列登录号分别为HQ244501和HQ259594。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 上篇 文献综述
• 第一章 西瓜枯萎病的病原菌概述及防治
• 1 西瓜枯萎病病原菌概述
• 1.1 西瓜枯萎病病原菌
• 1.2 西瓜枯萎病症状与发病规律
• 2 西瓜枯萎病菌的危害及致病机理
• 2.1 西瓜枯萎病的危害
• 2.2 西瓜枯萎病菌的致病机理
• 3 西瓜枯萎病的发病原因
• 3.1 种子带菌
• 3.2 苗床土带菌
• 3.3 选择砧木不当
• 3.4 嫁接过程中方法不当
• 3.5 气候条件和耕作模式
• 4 西瓜枯萎病的防治及其在防治中出现的问题
• 4.1 选用抗病品种
• 4.2 嫁接防治
• 4.3 农业防治
• 4.4 物理防治
• 4.5 化学防治
• 4.6 生物防治
• 4.7 西瓜枯萎病防治中出现的问题
• 第二章 西瓜枯萎病的生物防治研究进展
• 1 拮抗细菌
• 2 生防真菌
• 3 生防放线菌
• 4 其他生防因子
• 5 微生物农药在生物防治应用中的优点、存在的问题及解决途径
• 6 本研究的目的及意义
• 第三章 拮抗细菌对土传病原菌的作用机理
• 1 拮抗细菌对真菌病原物的作用
• 1.1 营养和生态位点的竞争
• 1.2 分泌抗菌物质
• 1.3 溶菌作用
• 1.4 诱导抗性
• 2 拮抗细菌对细菌病原物的作用
• 3 研究西瓜枯萎病菌生物防治的目的和意义
• 下篇 研究内容
• 第一章 西瓜枯萎病拮抗细菌的分离与筛选
• 摘要
• Abstract
• 1 材料与方法
• 1.1 样品采集
• 1.2 供试病原真菌
• 1.3 供试培养基
• 1.4 土壤拮抗菌株的分离
• 1.5 拮抗菌的筛选
• 1.6 数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 样品中西瓜枯萎病菌拮抗细菌的分离结果
• 2.2 西瓜枯萎拮抗菌的筛选
• 2.3 拮抗菌对植物病原真菌的抑菌活性测定
• 3 小结与讨论
• 第二章 拮抗菌对西瓜枯萎病控病作用的研究
• 摘要
• Abstract
• 1 材料与方法
• 1.1 样品的处理
• 1.2 拮抗菌的温室及田间防病试验
• 2 结果与分析
• 2.1 拮抗菌对西瓜枯萎病的温室防病效果
• 2.2 拮抗菌的田间防效试验
• 3 小结与讨论
• 第三章 拮抗菌对西瓜枯萎病防病机理初探
• 摘要
• Abstract
• 1 拮抗菌产拮抗物质的测定
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果与分析
• 2 拮抗菌在西瓜根部定殖能力测定
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果与分析
• 3 小结与讨论
• 第四章 两株西瓜枯萎病拮抗细菌的鉴定
• 摘要
• Abstract
• 1 材料与方法
• 1.1 菌株的形态鉴定
• 1.2 生理生化测试
• 1.3 菌株NBT-15和PL-82的16S rDNA序列分析
• 2 结果与分析
• 2.1 培养性状及形态特征
• 2.2 生理生化鉴定
• 2.3 序列测定、分析及系统发育树的构建
• 3 小结
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢