萘对斑马鱼（Danio rerio）胚胎发育毒性效应的研究

论文摘要

由于长期的燃料燃烧、石油泄漏等人为释放,多环芳烃化合物(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons,简称PAHs)已经对自然环境和人类健康构成了严重威胁。萘(Naphthalene,NAP)是结构最简单、挥发性最强的PAHs,具有光毒效应,其毒性研究已经成为一个备受关注的全球性课题。本研究以斑马鱼(Danio rerio)胚胎和仔鱼为试验体,应用胚胎发育技术探讨PAHs的代表——萘对斑马鱼胚胎的发育毒性。在萘急性毒性试验基础上,通过亚致死毒性、致畸性和组织病理学等指标评价了萘的水生毒性。胚胎急性毒性实验结果表明,萘24h、48h半数致死浓度(median lethal concentration,LC50)分别为10.04 mg／L、8.96 mg／L。萘导致斑马鱼胚胎发育中出现多种致死及亚致死反应,包括胚胎自溶、发育停滞、发育异常和20s内无自主活动、心律显著减少、黑色素细胞不发育、孵化延迟、72h畸形等,其中最敏感指标是72h畸形,半数效应浓度值EC50为10.64 mg／L。致畸症状包括卵黄囊肿(Yolk Edema, YE)、心包水肿(Pericardial Edema, PE)(出现心脏线状畸变)以及脊柱弯曲(Spinal Flection, SF)。在胚胎毒性实验的基础上,使用组织切片技术,考察萘在组织器官水平上的毒性,暴露3d的斑马鱼仔鱼主要在卵黄囊、心包、脊柱三种器官上出现畸形。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 第1章 前言
• 1.1 多环芳烃概述
• 1.2 萘的概述
• 1.3 萘污染现状
• 1.4 PAHs胁迫下鱼类生理生化响应
• 1.5 斑马鱼与毒理学研究
• 1.6 斑马鱼胚胎发育方法与毒理学研究
• 1.7 石蜡切片技术
• 1.8 研究目的与意义
• 1.8.1 研究目的与内容
• 1.8.2 研究意义
• 1.8.3 技术路线
• 第2章 实验材料与方法
• 2.1 实验试剂与仪器
• 2.1.1 主要试剂
• 2.1.2 主要仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 萘助溶剂的选择
• 2.2.2 实验动物驯养
• 2.2.3 受精卵的收集
• 2.2.4 斑马鱼胚胎急性毒性实验
• 2.3 萘暴露实验
• 2.4 石蜡切片的制备
• 2.5 组织显微观察
• 2.6 萘挥发的测定
• 2.7 数据统计和分析方法
• 第3章 结果与分析
• 3.1 萘对斑马鱼胚胎的急性毒性
• 3.2 萘挥发分析
• 3.3 萘的梯度暴露试验
• 3.4 斑马鱼胚胎发育的毒理学终点
• 3.5 萘对斑马鱼仔鱼的致畸效应
• 3.5.1 卵黄囊肿（Yolk Edema,YE）
• 3.5.2 心包水肿（Pericardial Edema,PE）
• 3.5.3 脊柱弯曲（Spinal Flection,SF）
• 第4章 讨论与结论
• 4.1 萘对斑马鱼胚胎的发育毒性
• 4.2 萘对72HPF斑马鱼仔鱼的致畸毒性
• 4.2.1 卵黄囊肿
• 4.2.2 心包水肿
• 4.2.3 脊柱弯曲
• 4.3 结论
• 参考文献
• 后记