论文摘要
目的:研究氯沙坦通过影响高血压大鼠心肌成纤维细胞间质成分抑制心室重构的药理机制。 方法:采用Sprague-Dawley大鼠建立两肾一夹型高血压模型,将大鼠随机分为对照组、高血压组和氯沙坦治疗组。采用鼠尾动脉测压法记录每周血压变化,实验末称体重,处死大鼠切取心脏,并计算心脏与体重比值。免疫组织化学方法测定心脏组织中Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶-2和JNK1/2表达。培养心肌成纤维细胞,免疫细胞化学法鉴定细胞,MTT法测氯沙坦和AngⅡ对细胞增殖活性影响的量效关系,WesternBlotting测AngⅡ刺激成纤维细胞心肌JNK1/2表达的时效关系。根据实验所得AngⅡ刺激心肌成纤维细胞增殖活性作用的EC50值、氯沙坦抑制心肌成纤维细胞活性作用的IC50值和AngⅡ刺激JNK1/2表达的最佳时间,心肌成纤维细胞分为无血清DMEM组、AngⅡ100 nM组、AngⅡ100nM+losartan 100mM组、losartan 100nM组,药物干预后分别收集各组蛋白质、培养上清液,Western blotting检测各组MMP-2、JNK1/2蛋白表达,ELISA检测分泌至培养上清液中MMP-2的量。 结果:左肾动脉结扎术后大鼠收缩压升高,心脏体重比值增加,心肌间质Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶-2、心肌细胞JNK1/2表达增多。氯沙坦治疗能显著降低大鼠收缩压,降低心脏体重比值,并且使心肌间质Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶-2、心肌细胞JNK1/2蛋白表达减少。AngⅡ刺激心肌成纤维细胞活性作用的EC50为53 nM,氯沙坦抑制心肌成纤维细胞活性作用的IC50为56.3 nM。JNK1/2蛋白表达在AngⅡ刺激2min
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