论文摘要
目的:通过不同浓度的吡哆胺对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞进行干预,观察细胞增殖情况的变化,监测不同时段TGFβ-1、MMP-2、TIMP-2和Fn的动态变化,研究证实吡哆胺对糖尿病患者的保护作用,并进一步探讨可能的作用机制。方法:体外高糖条件下培养大鼠肾小球系膜细胞,通过不同浓度吡哆胺对其进行不同时间的干预,借助MTT比色法观察细胞增殖情况的改变;利用半定量RT-PCR了解TGFβ-1、MMP-2、TIMP-2和Fn在mRNA水平表达的变化;采取ELISA法分析培养基上清TGFβ-1和Fn蛋白质含量;应用分光光度比色法检测细胞培养液上清MDA浓度。结果:高浓度的葡萄糖可以在24到72小时内促进系膜细胞增殖。高糖刺激TGFβ-1、TIMP-2和Fn在mRNA水平表达增加,提高上清丙二醛浓度,并增加TGFβ-1和Fn蛋白质含量,高糖使MMP-2在mRNA水平表达减少。吡哆胺可以抑制高糖促进的细胞增殖,可以减少TGFβ-1、TIMP-2和Fn在mRNA水平,降低上清MDA浓度,并减少TGFβ-1和Fn蛋白质含量,增加MMP-2在mRNA水平表达。结论:高糖在一定浓度和时间范围内促进系膜细胞增殖,使其表达TGFβ-1、MDA增加,破坏Fn合成和分解及MMP-2/TIMP-2的平衡,吡哆胺可以剂量依赖性的减弱高糖的作用。
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