去铁胺联合高三尖杉酯碱对K562细胞株体外凋亡及细胞周期的影响

去铁胺联合高三尖杉酯碱对K562细胞株体外凋亡及细胞周期的影响

论文摘要

目的:探讨去铁胺(Deferoxamine,DFO)对人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:采用MTT比色法观察DFO、高三尖杉酯碱(Homoharringtonine,HHT)单用及两者合用对体外培养的K562细胞凋亡的影响。采用HE染色、荧光染色观察用药后细胞形态,用流式细胞仪(Fluorescence Activated Cell Sorter,FACS)检测细胞凋亡率及细胞周期。结果:①MTT比色法测定显示DFO能抑制K562细胞增殖,呈剂量依赖性和时间依赖性。②DFO与HHT有明显的协同作用。用金氏公式判定50、100、200μmol/L DFO与0.05μg/ml HHT有协同抑制增殖作用。③流式细胞仪分析,DFO处理组出现一特征性的亚二倍体凋亡峰。其凋亡率呈时间、剂量依赖性。联合用药时,凋亡率高于单独用药组。④流式细胞术发现单用DFO可使K562细胞阻滞于G0/G1期,其阻滞细胞的数量与药物浓度呈正相关,以作用36小时对细胞周期的阻滞作用最强。联合用药时,细胞周期阻滞作用明显。结论:①DFO能有效地抑制人慢性粒细胞白血病细胞K562细胞增殖,其抗增殖作用具有时间、剂量依赖性。②DFO可体外诱导K562细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期。因此,阻滞细胞周期作用可能是DFO抗肿瘤的一个重要机制。③DFO与HHT联合对K562细胞具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡协同作用。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 前言
  • 第二章 实验材料与方法
  • 2.1 实验材料与试剂
  • 2.1.1 实验对象
  • 2.1.2 药物及试剂
  • 2.1.3 主要仪器
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 细胞培养
  • 2.2.2 实验步骤
  • 2.2.2.1 细胞生长抑制测定
  • 2.2.2.2 细胞形态及凋亡检测
  • 2.2.2.2.1 实验分组
  • 2.2.2.2.2 制片
  • 2.2.2.2.3 H E染色
  • 2.2.2.2.4 荧光染色
  • 2.2.2.2.5 流式细胞仪测定
  • 2.3 数据的统计学处理
  • 第三章 结果
  • 3.1 MTT比色法检测细胞抑制率
  • 3.2 流式细胞仪检测结果
  • 3.3 DFO作用后K562细胞形态学改变
  • 附图
  • 第四章 讨论
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 综述
  • 参考文献
  • 相关论文文献

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