论文题目: 远志中皂苷类免疫佐剂活性成分的分离及活性评价
论文类型: 博士论文
论文专业: 有机化学
作者: 孙红祥
导师: 潘远江
关键词: 远志,皂苷,免疫佐剂,结构,寡糖酯
文献来源: 浙江大学
发表年度: 2005
论文摘要: 远志为远志科植物远志（Polygala tenuifolia Willd.）或卵叶远志（P. sibirica L.）的干燥根。远志味苦、性温,归心、肾、肿经,具有安神益智、祛痰、消肿等功效,用于心肾不交、失眠多梦、吐痰不爽、健忘惊悸、乳房肿痛。远志属植物化学成分包括皂苷、山酮、寡糖酯、生物碱、黄酮类、苯丙素类、香豆素等。药理实验和临床研究表明,远志属植物具有镇咳祛痰、镇静和抗惊厥、抗氧化和抗衰老、降压、抗痴呆和脑保护作用、抑菌和抗炎、抑制酒精吸收、免疫增强及免疫佐剂、抗精神病、调血脂、抗凝血、抗血栓及抗肿瘤等多种生理活性。在前期工作中,我们选择具有免疫调节作用、并富含三萜皂苷的远志、三七、黄芪等八味中药,比较了这些中药总皂苷的溶血性及其对OVA受免小鼠细胞免疫和体液免疫应答的影响,发现远志总皂苷（P. tenuifolium saponins,PTS）不仅免疫佐剂活性较 Quil A显著,且其溶血性远较Quil A小。本课题在此基础上,应用现代天然药物化学技术及免疫学方法,以免疫佐剂活性评价为导向,对远志总皂苷中的免疫佐剂活性成分进行定向追踪筛选,分离得到6个具有显著佐剂活性的皂苷,采用化学方法和包括ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HMQC及HMBC谱等多种光谱技术确定了化学结构,并对这6个皂苷化合物进行了免疫佐剂活性评价。 1.提取与分离 远志干燥块根用70%乙醇回流提取,乙醇提取物用乙醚脱脂后,以水饱和正丁醇萃取,得到远志总皂苷（PTS）。PTS中免疫佐剂活性最强的流份B经硅胶柱色谱、Rp-18柱色谱及半制备HPLC分离、纯化,得到化合物1-18。 2.结构测定 采用化学方法和包括ESI-MS、HRESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HMQC及HMBC等光谱技术分析测定化合物1-18的化学结构。化合物1-6为皂苷类化合物,7-12为五糖酯类化合物,13-18为二糖酯类化合物。其中皂苷tenuifolisaponin A（4）、B（5）、五糖酯tenuifoliose R（12）、二糖酯tenuifoliside F（14）为新化合物,polygalasaponin ⅩⅩⅧ（3）、ⅩⅩⅦ（6）和glomeratose B（16）为首次从植物远志（P. tenuifolium）根中分离得到。 3.溶血性试验 采用比色法测定6个皂苷化合物引起兔红细胞50%溶血浓度(HD50值)。结果表明:6种皂苷除化合物6外,其余5种皂苷的溶血性均显著低于Quil A（p<0.001）,化合物3的溶血性最小,几乎无溶血作用。
论文目录:
摘要
Abstract
文献综述
远志属植物化学成分及生物活性研究进展
正文
远志中皂苷类免疫佐剂活性成分的分离及活性评价
前言
1.材料与仪器
2.方法
2.1 提取分离
2.2 溶血性实验
2.3 免疫程序
2.4 小鼠脾淋巴细胞增殖试
2.5 血清中OVA特异性抗体效价测定
2.6 血清中细胞因子含量测定
3.结果
3.1 结构分析
3.2 溶血性结果
3.3 对OVA受免小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响
3.4 对OVA受免小鼠血清中特异性抗体效价的影响
3.5 对OVA受免小鼠血清中细胞因子含量的影响
4.讨论
5.参考文献
6.表
7.图
发表论文
致谢
发布时间: 2005-10-26
参考文献
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