论文摘要
目的研究我院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）对碳青霉烯类耐药的分子机制,并通过分子流行病学研究探讨我院CRAB的分离率迅速上升的原因。方法收集我院2009年5月分离的非重复耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌30株,采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术分析它们的同源性,应用多位点序列分型（MLST）技术明确各克隆株的ST型。筛查各种β-内酰胺酶（主要是碳青霉烯类水解酶）:表型筛查;基因型筛查——DNA扩增、测序（各种金属β内酰胺酶如IPM、VIM、SIM等;能够水解碳青霉烯类抗生素的D类β内酰胺酶如OXA-23、OXA-24、OXA-58、OXA-51等; AmpC酶等）。PCR筛查Ⅰ类整合子和插入序列ISAba1。结果PFGE显示我院CRAB存在两个克隆,分为A、B型,2009年5月分离的30株非重复CRAB中,有19株属于克隆株A,11株属于克隆株B,克隆株A和克隆株B均广泛分布于各科室,创伤外科、ICU、呼吸内科等科室同时存在两个CRAB克隆。MLST结果显示,克隆株A属于ST91,克隆株B属于ST90,ST91同时携带blaOXA-23和blaOXA-58,而ST90只携带blaOXA-23。11株ST90克隆株均检出整合酶基因intⅠ1,而19株ST91克隆株未扩增出整合酶基因。所有菌株blaOXA-23、blaOXA51基因的上游均发现有ISaba1,9株ST90克隆株blaAmpC的上游发现插入序列ISaba1。金属酶表型实验未发现阳性,PCR未扩增出IMP、VIM、SIM等金属β-内酰胺酶基因。结论我院同时存在两个不同遗传背景的CRAB克隆在科室间传播,临床应予以重视。插入序列ISAba1介导blaOXA-23是我院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药的主要分子机制。两个CRAB克隆可能是由相应ST型的敏感株独立进化而来,在应对抗生素选择性压力时各有优势,ST91同时携带blaOXA-23和blaOXA-58,ST90携带blaOXA-23,且存在插入序列ISAba1介导blaAmpC基因的高表达,具有整合酶基因intⅠ1。
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