本文主要研究内容
作者马洪圆,岳玉环,李泽鸿,张国利,田园,吴广谋,刘雨玲,余晓颖,杨雯棋,陈云雨（2019）在《LHRH介导的TAT蛋白核心肽PTD的制备及跨膜研究》一文中研究指出：为了研究促黄体激素释放激素(LHRH)介导的TAT蛋白核心肽PTD的跨膜作用,测定目的蛋白的转导效率,试验以pET28a-PTD-GFP质粒为模板,设计含LHRH基因序列的特异性PCR引物,经PCR扩增后双酶切,并克隆到原核表达载体pET28a中,构建重组质粒并在E.coli BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达,超声破碎后进行硫酸铵梯度沉淀,取上清液用Phenyl-HP疏水层析柱和Q阴离子交换层析柱纯化,将纯化后的目的蛋白加到体外培养的HeLa细胞中,观察转导情况,分析目的蛋白浓度对转导效率的影响。结果表明:PCR扩增得到目的基因LHRH-PTD-GFP,并成功构建出重组质粒pET28a-LHRH-PTD-GFP,在E.coli BL21(DE3)感受态细胞中成功诱导表达出目的蛋白,经Phenyl-HP疏水层析柱和Q阴离子交换层析柱成功纯化出目的蛋白,在荧光显微镜下HeLa细胞内显现明显的绿色荧光,经分析转导效率与目的蛋白浓度之间呈正相关,回归系数为0.096 6,决定系数(R~2)为0.937 8。说明LHRH介导的TAT蛋白核心肽PTD具有很好的跨膜特性,转导效率对目的蛋白浓度具有依赖性,在一定浓度范围内随着目的蛋白浓度的增加转导效率增大。
Abstract
wei le yan jiu cu huang ti ji su shi fang ji su (LHRH)jie dao de TATdan bai he xin tai PTDde kua mo zuo yong ,ce ding mu de dan bai de zhuai dao xiao lv ,shi yan yi pET28a-PTD-GFPzhi li wei mo ban ,she ji han LHRHji yin xu lie de te yi xing PCRyin wu ,jing PCRkuo zeng hou shuang mei qie ,bing ke long dao yuan he biao da zai ti pET28azhong ,gou jian chong zu zhi li bing zai E.coli BL21(DE3)gan shou tai xi bao zhong you dao biao da ,chao sheng po sui hou jin hang liu suan an ti du chen dian ,qu shang qing ye yong Phenyl-HPshu shui ceng xi zhu he Qyin li zi jiao huan ceng xi zhu chun hua ,jiang chun hua hou de mu de dan bai jia dao ti wai pei yang de HeLaxi bao zhong ,guan cha zhuai dao qing kuang ,fen xi mu de dan bai nong du dui zhuai dao xiao lv de ying xiang 。jie guo biao ming :PCRkuo zeng de dao mu de ji yin LHRH-PTD-GFP,bing cheng gong gou jian chu chong zu zhi li pET28a-LHRH-PTD-GFP,zai E.coli BL21(DE3)gan shou tai xi bao zhong cheng gong you dao biao da chu mu de dan bai ,jing Phenyl-HPshu shui ceng xi zhu he Qyin li zi jiao huan ceng xi zhu cheng gong chun hua chu mu de dan bai ,zai ying guang xian wei jing xia HeLaxi bao nei xian xian ming xian de lu se ying guang ,jing fen xi zhuai dao xiao lv yu mu de dan bai nong du zhi jian cheng zheng xiang guan ,hui gui ji shu wei 0.096 6,jue ding ji shu (R~2)wei 0.937 8。shui ming LHRHjie dao de TATdan bai he xin tai PTDju you hen hao de kua mo te xing ,zhuai dao xiao lv dui mu de dan bai nong du ju you yi lai xing ,zai yi ding nong du fan wei nei sui zhao mu de dan bai nong du de zeng jia zhuai dao xiao lv zeng da 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自黑龙江畜牧兽医的马洪圆,岳玉环,李泽鸿,张国利,田园,吴广谋,刘雨玲,余晓颖,杨雯棋,陈云雨，发表于刊物黑龙江畜牧兽医2019年01期论文，是一篇关于核心肽论文,转促黄体激素释放激素论文,目的蛋白论文,转导效率论文,绿色荧光论文,跨膜论文,黑龙江畜牧兽医2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自黑龙江畜牧兽医2019年01期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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