论文摘要
虫害是危害农作物高产的主要原因之一。用化学杀虫剂来控制害虫,成本较高,还会造成环境污染。使用生物技术可将外源基因导入农作物,使其具有抗虫性。蝎毒基因与昆虫几丁质酶基因都是重要的抗虫基因。普通烟草（Nicotiana tabacum L.）由于其组织培养的易操作性和较强再生能力,是植物基因工程的模式植物。利用烟草这一模式植物研究外源基因在转基因植物中的协同表达,对抗虫基因工程研究有一定理论意义。 本研究将含有几丁质酶基因和蝎毒基因双价抗虫基因的重组质粒pBI101-Chi-BmK ITS经酶切连接后,筛选得到两个含单价抗虫基因的重组质粒pBI101-BmK ITS与pBI101-Chi,分别含有蝎毒基因和几丁质酶基因。 利用冻融法将三个重组质粒pBI101-Chi-BmK ITS、pBI101-Chi与pBI101-BmK ITS分别转化农杆菌LBA4404中,经过遗传标记筛选,PCR鉴定,获得含有目的基因的农杆菌。 大量培养烟草无菌苗,用叶盘法对烟草苗进行农杆菌介导的基因转化实验,得到一些有一定价值的研究数据,为下一步研究奠定了基础。