养阴抗毒胶囊及拆方对阴虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素细胞和血清CORT，SOD，MDA的影响

论文摘要

目的本实验以氢化可的松造成阴虚大鼠模型,观察养阴抗毒胶囊(YC)及拆方对阴虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)细胞的免疫组织化学变化,以及对血清皮质醇(CORT),超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响。探讨YC对HPA轴抑制大鼠模型的作用和机理,为临床进一步应用YC治疗GC不良反应提供实验依据。方法实验1观察养阴抗毒胶囊(YC)及拆方对阴虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)细胞的影响清洁级健康雄性SD大鼠40只(体质量200±20g),随机分为4组,即:正常对照组,阴虚模型组(YD),养阴抗毒胶囊(YC)组和拆方抗毒组(大小蓟、槐花),每组10只.YC胶囊内粉末进行再次粉碎,过100目筛,加入蒸馏水后超声振荡成5mg/mL的混悬液,拆方抗毒组颗粒剂在临用前加入蒸馏水配制成浓度为5 mg/mL的混悬液,YC、拆方抗毒组颗粒剂按成人剂量的25倍,7.5g/d,按平均200g/只计算,0.5g/只,用蒸馏水稀释至0.2g/ml.每天早晨给予2 ml/d相应的药液灌胃,空白对照组及YD组给予2 ml/d的蒸馏水灌胃,共3 d。第4日起除空白对照组外,其余各组均按阴虚大鼠模型复制方法,每日17:00按50 mg/kg剂量给予氢化可的松灌胃,连续4 d,空白对照组给予2ml/d的蒸馏水灌胃。大鼠在造模结束1d后(第9日),各组同期断头处死,2min内取出垂体,用4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,按ABC法做ACTH免疫组化染色。实验2养阴抗毒胶囊对阴虚大鼠CORT、SOD和MDA的影响模型复制如实验一,各组均在造模结束1d后(第9日)08:00—09:00间,以1ml/kg剂量速眠新Ⅱ麻醉后心脏取血,测定血清SOD MDA、CORT的含量。SOD含量测定用黄嘌呤氧化酶比色法,MDA含量测定用硫代巴比妥钠比色法,CORT含量用放射免疫法(RIA)。结果1、ACTH细胞免疫组织化学观察结果:ACTH细胞多为不规则形,细胞核呈圆形,未着色,ACTH阳性免疫物胞浆着色,替代对照未见阳性物质。免疫组化染色结果显示,对照组ACTH在垂体前叶内广泛表达,免疫组化阳性反应较强,每个视野阳性细胞数比值95±27.3,YD组与空白对照组相比ACTH表达增多,每个视野阳性细胞数比值157±67.8(P＜0.05),提示阴虚模型建立成功。YC组较YD组ACTH表达减少,每个视野阳性细胞数比值102±37.5(P＜0.05),而拆方组无明显差异,每个视野阳性细胞数比值145±47.8。2、对大鼠血清CORT,SOD和MDA结果:YD组血清CORT含量明显高于正常对照组(P＜0.05),说明动物模型复制成功。YC组CORT含量低于YD组(P＜0.05),提示YC对外源性GC所致阴虚大鼠血清CORT亢进有一定抑制作用,而拆方抗毒组无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05,);与正常对照组相比,YD组SOD活性明显降低,MDA含量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),与YD组相比,YC组大鼠血清SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05),而拆方抗毒组无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05)。结论YC组中药能够明显降低阴虚大鼠垂体ACTH的表达,抑制HPA轴功能亢进状态,提高大鼠血清中SOD活性,降低MDA含量,使机体的氧化与抗氧化系统恢复平衡,从而缓解肾上腺功能亢进症状,达到滋阴清热,改善阴虚状态的功效,为临床进一步应用YC治疗GC不良反应提供了实验依据。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 实验内容
• 1 引言
• 2 实验材料
• 3.实验方法
• 4.结果
• 4.1 实验动物一股情况
• 4.2 各组大鼠体重变化
• 4.3 各组大鼠血清CORT含量变化
• 4.4 各组大鼠垂体ACTH的表达情况
• 4.5 各组大鼠血清SOD,MDA水平变化
• 5.讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢