论文摘要
银屑病是一种常见的慢性炎症性、增殖性皮肤病,顽固难治、易复发,目前尚缺乏理想的治疗方法。中药治疗银屑病在我国历史悠久,凉血活血复方秉承了传统中医理论及中医验方,具有凉血、活血、祛风、理湿等功效。经动物实验和初步的临床研究证实对银屑病有较好疗效。黄芪注射液含有黄芪的主要有效成分。现代药理研究表明具有免疫增强和免疫调节作用。以往研究证明治疗银屑病有效,但其抗病机制尚不完全明了。目的:本研究旨在比较传统中药方剂的临床疗效,并观察凉血活血复方和黄芪注射液联合应用对疗效的影响;在此基础上考查凉血活血复方和黄芪注射液对体外培养的永生化人角质形成细胞株(HaCaT细胞)的增殖、凋亡及VDR表达的影响,探索银屑病的发病机制,明确维凉血活血复方和黄芪注射液的可能机制,,为中药联合应用以减毒增效提供实验依据。方法:(1)临床研究:选择经临床检查或皮肤病理活检确诊的银屑病患者165例口服凉血活血复方煎剂,疗程2-4月。同时设部分患者联合应用黄芪注射液。采用国际通用的银屑病皮损严重程度评分(PASI)法判定临床疗效,应用黄芪注射液者与未用者之间的疗效进行统计学分析。(2)实验研究:将不同浓度的凉血活血复方水醇粗提液作用于体外培养的HaCaT细胞,采用MTT法检测药物对细胞的增殖抑制作用和有效浓度;光镜和电镜观察细胞形态改变;用流式细胞术检测细胞周期的变化及凋亡比率。结果:(1)中药凉血活血复方治疗组的总有效率分别为64.2%;联合应用黄芪治疗者有效率高于未用黄芪者。(2)凉血活血复方煎剂对HaCaT细胞增殖有明显的抑制作用,作用24、48、72小时,凉血活血复方煎剂对抑制HaCaT细胞增殖的IC50分别为155.83mg/ml, 71.57mg/ml, 41.27mg/ml。在一定浓度范围内其抑制率呈时间和剂量依赖性。(3)流式细胞仪检测结果显示,与阴性对照组相比,凉血活血复方煎剂对抑制HaCaT细胞形态学和流式细胞仪检测发现药物以浓度依赖性的方式干扰细胞周期、诱导细胞凋亡,细胞分裂周期阻滞于G2/M期。电镜下出现典型的凋亡细胞形态学特征。结论:(1)中药凉血活血复方治疗银屑病有较好疗效,与黄芪联合应用可提高疗效。(2)中药凉血活血复方对HaCaT细胞增殖有明显的抑制作用,且在一定浓度范围内其抑制率呈明显的时间和剂量依赖性。可干扰HaCaT细胞周期,细胞阻滞于G1期,使之不能进入G2/M期进行分裂增殖;作用于HaCaT细胞后均可诱导其凋亡,提示中药凉血活血复方抗银屑病机制可能与此有关。
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