论文摘要
目的：建立N-亚硝基双（2-氧丙基）胺[N-Nitrosobis（2-oxopropyl）amine, BOP]诱导型金黄地鼠胰腺癌模型,探讨金黄地鼠胰腺及胰腺癌的MR表现。材料与方法：雌性叙利亚金黄地鼠101只,依体质量大小,采取随机排列表法,随机分为3组：健康组（第1组）,5只,用于金黄地鼠正常胰腺解剖及MR成像研究。BOP处理组（第2组）,80只,均分为8.个亚组,按10mg·kg-1·W-1分别皮下注射BOP,持续7周,建立BOP诱导型胰腺癌模型；NACL处理组（第3组）,16只,均分为8个亚组,分别皮下注射等量生理盐水作为造模对照组。所有实验鼠均使用GE 1.5T MR扫描仪,并运用小鼠专用动物实验线圈,行横断面及冠状面MR成像,扫描序列为横断面SE T1W.SPGR T1W.FRFSE T2W、冠状面SPGR T1W、FRFSE T2W。将MR数据传输至GEAW4.1工作站。在第1组中,观察：①胰腺的形态、大小及轮廓；②胰腺的分布；③胰腺信号特点：④胰腺的毗邻关系。扫描后剖腹观察,与MR发现对照；在胰腺周围放置装水的塑料软管,将腹腔器官、组织还原后,进行第2次MR扫描,以明确胰腺MR表现。过度麻醉法处死金黄地鼠,并完整取出胰腺供解剖及组织学研究。首次注射后第11周开始,至第25周,每两周1次,对第2组及第3组进行MR成像。在MRI上观察：①肿瘤位于胰腺的部位；②肿瘤数量；③肿瘤形态、轮廓；④测量肿瘤的大小及体积,⑤肿瘤与周围组织的关系。⑥肿瘤信号特点。每次MR扫描后,立即处死各1个亚组,剖腹肉眼观察,与MR发现对照,记录胰腺及肿瘤的肉眼观察结果,完整取下标本,称取肿瘤质量,测量肿瘤直径与体积；10%福尔马林液固定标本,石蜡包埋,常规切片,HE染色,由病理科医师对所有切片行组织病理学诊断。将BOP诱导发生的胰腺病变按进展过程分为不典型导管增生（atypical ductal hyperplasia, ATH）、原位癌（carcinoma in situ, CIS）、浸润癌（invasive carcinoma, CA）三类。结果：活体金黄地鼠胰腺呈淡粉红色,被覆透明浆膜,分为三叶,即胃叶、脾叶、十二指肠叶,汇合于胰头,呈三叶草样。5只健康金黄地鼠胰腺胃叶、脾叶、十二指肠叶长径分别为19.60±3.21mm,22.40±3.05mm和9.40±2.07mm。十二指肠叶最短,与其它两叶比较,差异均具有统计学意义（p=0.000）；胃叶、脾叶长径差异没有统计学意义（p>0.05）。胃叶、脾叶、十二指肠叶短径分别为5.26±0.67mm,4.98±0.47mm,5.48+0.63mm,三者差异没有统计学意义（F=0.891,p>0.05）。在MRI上,脾叶、胃叶、十二指肠叶、胰头分别在5,4,3,4只鼠中显示；其中,胰腺四部均显示的有2只；三部显示的有2只；两部显示的有1只。脾叶显示呈长条形,位于脾、胃、左肾上极之间,胰尾可达脾门；胃叶位于胃壁后缘及右缘；十二指肠叶位于胃窦后,紧贴十二指肠,形态不规则；三叶结构汇合于胰头。显示的胰腺信号均匀,可见清晰的轮廓。在T1W上,金黄地鼠正常胰腺信号强度低于肝脏,T2W信号强度高于肝实质,这与人类正常胰腺MR信号特点有所不同。在所有的扫描序列,胰腺主胰管及侧支胰管均未见显示。肉眼观察,第2组在18只金黄地鼠中发现23个胰腺肿瘤,其中,1只发现3个胰腺肿瘤,3只发现2个,其余均为单发。其中,7个肿瘤直径<5.0 mm,16个肿瘤直径≥5.0mm,最小肿瘤直径2.0mm,最大肿瘤直径17.0mm。肿瘤直径中位数6.8mm,体积中位数178.7mm3,质量中位数0.32g。最早于第1次注射BOP后15周发现胰腺结节。多数肿瘤呈粉红或肉红色,部分肿瘤为红白相间色。部分肿瘤表面不规整,略呈分叶状。剖开肿瘤,可见出血及坏死灶。肿瘤较大时与周围组织结构分界不清,不易剥离。病理组织学证实,首次注射BOP后第11周,实验组的一个亚组中5只鼠发现不同程度的胰腺ATH；共在65只中发现ATH（81.3%,65/80）。第2组在26只鼠中发现31个胰腺癌,均为胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinomas, PDAs）,发病率32.5%（26/80）。其中,最早于第1次注射BOP后13周发现CIS,共在9只鼠中发现9个CIS（29.0%,9/31）；最早于第19周发现CA,实验组共在17只鼠中发现22个CA（71.0%,22/31）。所有荷瘤鼠均伴有ATH,所有没有发现ATH的地鼠均未发现PDAs。肉眼发现的23个肿瘤中,20个为CA,3个为CIS；肉眼未能发现的8个PDAs中2个为CA,6个为CIS。在PDAs周围可见不同程度的结缔组织增生及炎细胞反应。第2组共75只金黄地鼠完成1次或多次MR扫描；累计进行210次MR扫描。累计在40次MR扫描中在15只鼠发现15个肿瘤,其中,胰头2个（2/15,13.3%）；脾叶7个（7/15,46.7%）；胃叶5个（5/15,33.3%）；十二指肠叶1个（1/15,6.7%）。MR对肉眼发现肿瘤的检出率为65.2%（15/23）。MR测量肿瘤直径为7.80±3.19mm,其中,2个肿瘤（2/15,13.3%）直径小于5.0mm；13个肿瘤（13/15,86.7%）直径大于/等于5.0mm。MR测量最大与最小体积为别为1642.60mm3和15.06mm3。最早于第1次注射BOP后19发现肿瘤,位于胃叶,直径约3.0mm。MR测量体积与肿瘤质量相关系数为0.96（p=0.000,n=15）。在MR发现的15个肿瘤中,2个直径小于5.0mm的肿瘤显示信号均匀,形态规则,边界清晰,T1WI呈低信号,T2WI呈中高信号；13个直径大于／等于5.0mm的肿瘤主要表现为信号不均,形态不规则,境界不清晰。组织学检查证实MR发现的15个肿瘤均为PDAs。结论：1.金黄地鼠胰腺分为胃叶、脾叶、十二指肠叶共三叶,汇合于胰头,呈三叶草样。2.使用小鼠专用动物实验线圈,结合横断面及冠状面扫描,MRI能清晰显示金黄地鼠正常胰腺。3.金黄地鼠正常胰腺信号强度低于肝脏,T2W信号强度高于肝实质,这与人类正常胰腺MR信号特点有所不同。4.经皮下注射BOP成功建立诱导性金黄地鼠胰腺癌动物模型。5.BOP诱导发生的胰腺病变包括ATH、CIS、CA三类,揭示了胰腺癌的发生、发展过程。6.BOP诱导性金黄地鼠胰腺癌均为PDAs,伴有结缔组织增生及炎细胞反应,与人胰腺癌近似。7.MRI能早期检测BOP诱导型金黄地鼠胰腺癌,并可准确描述胰腺癌的特点。8.MR测量体积与肿瘤质量具有高相关性,可以精确反应肿瘤体积变化,可以用于监测肿瘤的发展、变化。9.MRI或许可以用于胰腺癌治疗反应的监测与评估。