论文摘要
[研究背景]癌相关成纤维细胞（carcinoma-associated fibroblasts，CAFs）是肿瘤—宿主界面微环境（tumor-host interface microenvironment）中最重要的宿主细胞，具有独特的生物学特性和功能。血管内皮细胞（vascular endothelial cell，VEC）是血管生成的靶细胞，肿瘤血管新生受微环境中庞大精密而复杂的信号网络调控，过去的研究多集中于肿瘤细胞对其的调控作用；新近研究发现，CAFs在肿瘤VEC的募集、增殖和血管芽的形成中发挥重要作用。本课题在原有研究基础上，拟进一步探讨口腔CAFs对血管内皮细胞生物学特性的影响，目前国内外尚未见相关报道。[研究目的]通过建立CAFs和血管内皮细胞株ECV304交互作用模型系统：（1）研究口腔CAFs对ECV304细胞形态及活性的影响；（2）研究口腔CAFs对ECV304细胞迁移特性的影响。[研究方法] （1）用组织块培养法获得原代口腔CAFs及正常成纤维细胞（normal fibroblasts，NFs），建立口腔CAFs和人脐静脉内皮细胞株ECV304相互作用模型，观察CAFs对ECV304细胞形态及生长状况的影响，并采用甲基噻唑基四唑（methyl-thiazolyl tetrazolium，MTT）比色实验检测口腔CAFs对ECV304细胞活性的影响。（2）采用细胞片刮除法检测ECV304在CAFs条件培养基作用下随机运动能力的变化；同时采用微孔滤膜培养小室及双室联合培养系统检测CAFs对ECV304趋化性迁移能力的影响。[研究结果] （1）与CAFs直接共培养时ECV304细胞形态发生变化；与NFs相比，受CAFs作用的ECV304细胞活性在24h、48h时均明显增强（P＜0.05）；（2）与NFs相比，CAFs作用24h下，ECV304细胞随机迁移数量增多（P＜0.05）且最大迁移距离有增大趋势；受CAFs作用12h、24h时，ECV304趋化性迁移能力明显增强（P＜0.05），更多ECV304细胞穿透微孔滤膜发生迁移。[结论]口腔CAFs在体外具有增强人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞活性及迁移的能力。本研究首次探讨了口腔CAFs对血管内皮样细胞生物学特性的影响，有助于了解口腔CAFs在血管新生中的作用，为进一步研究CAFs调控肿瘤血管新生的作用及其机制提供实验依据。