论文摘要
目的:目前的研究已经证实DNA修复酶—O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O6-methylguanine DNA methyltransferase,MGMT）在脑胶质瘤组织中表达与肿瘤细胞对BCNU等亚硝脲类药物的耐药密切相关,并影响肿瘤的化疗效果和病人的预后。在许多肿瘤中发现启动子区过甲基化而导致MGMT基因的转录失活,但是启动予区过甲基化与MGMT蛋白的表达、化疗耐药及患者预后之间的关系尚未完全阐明。本文拟从三个方面对MGMT基因启动子甲基化进行研究:1)人脑胶质瘤细胞株MGMT基因启动子过甲基化同细胞株对BCNU耐药的关系;2)胶质瘤患者肿瘤组织MGMT基因启动子过甲基化和肿瘤组织中MGMT蛋白表达的关系;3)胶质瘤患者肿瘤组织和其对应血清中MGMT基因启动子过甲基化是否有一致性。 材料与方法:研究对象为9株人脑胶质瘤细胞株、27例临床胶质瘤患者的肿瘤组织和其对应的血清。采用美国Gentra公司的试剂盒以盐析法提取基因组DNA,并采用美国Chemicon公司CpGenomeTM DNA修饰试剂盒对组织DNA进行亚硫酸氢盐修饰,采用甲基化特异性PCR法（Methylation-specific PCR,MSP）进行MGMT基因启动子区甲基化水平的检测;采用sulforhodamine B（SRB）Colorimetric抗癌药筛选法测定人脑胶质瘤细胞株对BCNU的敏感性;采用免疫组化的方法来检测胶质瘤患者肿瘤组织标本中MGMT蛋白表达程度。实验结果采用SPSS 12.0统计软件处
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