川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤模型Caspase-3、神经丝蛋白(NF-L、NF-H、NF-M)表达的影响

川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤模型Caspase-3、神经丝蛋白(NF-L、NF-H、NF-M)表达的影响

论文摘要

目的研究川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型的脊髓功能的保护作用及对损伤段脊髓半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、神经丝蛋白(NF-L、NF-H、NF-M)表达的影响。方法正常成年SD大鼠88只,随机分成三组:(1)假手术组(S组,n=8);(2)假治疗对照组(C组,n=40);(3)实验组(T组,n=40)实验组和假治疗组对照组大鼠按术后动物存活的时间再各分为1小时组,3小时组,6小时组,1天组,3天组,7天组,14天组和21天组,共八个亚组,每亚组5只大鼠。采用改良ALLEN氏重物打击法制作脊髓中度损伤模型80个。实验组(T组)大鼠伤后30分钟后开始予川芎秦注射液经腹腔内注射200mg/kg,每天给药一次,存活时间少于5天者用药至死,多于5天者用药5天。对照组(C组)大鼠给予等量的生理盐水经腹腔内注射,给药次数和实验组相同。在造模后的相应时间点分别处死对应组大鼠并取脊髓标本,每只大鼠取以损伤段为中心的长约1cm的脊髓组织。在每个脊髓标本纵轴中心横行切片,每个检测指标2张,分别作Caspase-3,NF-L、NF-H、NF-M的免疫组化染色,观察各自的表达情况并计数。SPSS11.0统计分析软件对比两组动物的脊髓标本不同时间点Caspase-3、神经丝蛋白(NF-L、NF-H、NF-M)的表达是否有统计学差异。此外,1天及超过1天处死的大鼠在处死前作改良Rivilin斜板实验和BBB评分,以此评测脊髓运动神经功能,统计学分析两组间是否有差异。结果术后3天,7天和14天三个时间点上,Caspase-3表达值实验组较假治疗对照组低,P<0.05,有统计学意义;神经丝蛋白(NF-L、NF-H、NF-M)表达值,实验组较假治疗对照组表达高,P<0.05,有统计学意义。其中Caspase-3表达值在术后7天时最低,NF-L表达值在术后7天时最高,NF-H和NF-M表达值则在术后3天时即达最高。统计学相关性分析结果显示Caspase-3在术后3天时与NF-L、NF-M、NF-H为负相关性,在术后7天时与NF-H为负相关性,在术后14天时与NF-M为负相关性;NF-L与NF-M在术后3天、NF-M与NF-H在术后3天和21天、NF-L与NF-H在术后6小时和7天时为正相关性,P<0.05,有统计学意义。改良Rivlin斜板实验,术后斜板临界度数均值逐渐升高,实验组均较对照组斜板临界度数高,且在术后7天,14天和21天时,P<0.05,有统计学意义。相关性分析结果显示改良Rivlin斜板临界角度在术后7天时与NF-L为正相关性,术后14天时与NF-H为正相关性,P<0.05,有统计学意义。BBB评分均值术后逐渐升高,实验组均较对照组评分值高,且在术后7天,14天和21天时,P<0.05,有统计学意义。相关性分析结果显示BBB评分值在术后14天时与NF-L、术后21天时与NF-M为正相关性;在术后14天时,与Caspase-3有负相关性,P<0.05,有统计学意义。结论川芎嗪对脊髓继发性损伤有保护作用。川芎嗪能抑制大鼠急性脊髓损伤模型损伤段脊髓Caspase-3表达、促进神经丝蛋白(NF-L、NF-H、NF-M)的表达。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 第一章 前言
  • 第二章 材料和方法
  • 2.1 主要设备和试剂
  • 2.2 大鼠分组和饲养
  • 2.3 大鼠急性脊髓损伤模型的制作
  • 2.4 大鼠给药
  • 2.5 脊髓功能的行为学评分
  • 2.6 大鼠脊髓标本的收取
  • 2.7 大鼠脊髓组织蜡块切片
  • 2.8 ABC(亲和素-生物素复合酶)染色法检测(按厂家的试验操作流程和标准进行)
  • 第三章 结果
  • 3.1 行为学评价
  • 3.2 HE染色病理改变
  • 3.3 Caspase-3、神经丝蛋白(NF-L、NF-H、NF-M)表达
  • 3.4 相关性分析
  • 第四章 讨论
  • 4.1 脊髓损伤模型的选择
  • 4.2 实验动物的给药
  • 4.3 脊髓损伤功能评价及方法选择
  • 4.4 Caspase-3、神经丝蛋白(NF-L、NF-M、NF-H)和脊髓损伤
  • 4.5 川芎嗪对脊髓损伤的保护作用
  • 4.6 展望
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 相关论文文献

    • [1].NF-H在无症状颈动脉狭窄患者血清中的表达与认知功能的关系[J]. 阿尔茨海默病及相关病杂志 2020(03)
    • [2].血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响[J]. 中国中药杂志 2015(07)
    • [3].脐血NF-H、S100β蛋白检测在诊断新生儿缺血缺氧性脑病中的应用价值[J]. 国际检验医学杂志 2013(09)

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