论文摘要
第一部分靶向MMP-9的脱氧核酶抑制人肺腺癌A549细胞中MMP-9蛋白表达目的探讨靶向MMP-9的脱氧核酶(DNAzyme,Deoxyri bozyme)对人肺腺癌A549细胞中MMP-9蛋白表达的影响。确定靶向MMP-9的脱氧核酶对MMP-9的mRNA切割的有效性。方法设计靶向MMP-9的脱氧核酶,应用oligofectamine将脱氧核酶转染到A549细胞中。实验分三组:空白组为A549培养细胞,对照组为将control oligo转染A549细胞,实验组为靶向MMP-9的脱氧核酶转染A549细胞。靶向MMP-9的脱氧核酶与对照control oligo终浓度均为2 uM。采用Western Blot方法检测细胞中MMP-9蛋白表达。结果在靶向MMP-9的脱氧核酶干预1d后人肺腺癌A549细胞中MMP-9蛋白表达较对照组与空白组显著减低(p<0.01),而空白组与对照组细胞中蛋白条带灰度值无明显差异(p>0.05)。结论靶向MMP-9的脱氧核酶在肺腺癌A549细胞中能够有效地抑制MMP-9蛋白的高表达。第二部分靶向MMP-9的脱氧核酶对人肺腺癌A549细胞粘附与迁移作用的影响目的在证实靶向MMP-9的脱氧核酶能够有效抑制A549细胞中MMP-9蛋白表达的基础上,我们进一步研究靶向MMP-9的脱氧核酶对人肺腺癌A549细胞粘附与迁移作用的影响。方法应用oligofectamine将脱氧核酶转染到A549细胞中。利用细胞粘附与迁移试验观察脱氧核酶干预后细胞粘附与迁移能力的变化。结果经靶向MMP-9的脱氧核酶干预后,2h和4h细胞粘附率,迁移速度均显著降低(p<0.01),而对照组与空白组之间无差异(P>0.05)。结论靶向MMP-9的脱氧核酶在肺腺癌A549细胞中能够有效阻止细胞的粘附与迁移。
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