论文摘要
我国从美国、巴西、阿根廷等国进口的大豆逐年增加,而这些国家大都是大豆危险性真菌病害发生较为严重的疫区,为了提高口岸的检疫质量和效率,防止其传入我国,对大豆上危险性真菌病害建立一套快速的检测方法及实用的处理技术是关键。大豆间座壳/拟茎点综合症（除大豆茎荚枯腐病外）和大豆猝死综合症是大豆上重要的检疫病害,本文对它们分别进行了研究。大豆间座壳/拟茎点综合症病菌包括:大豆北方茎溃疡病菌（简称DPC）、大豆南方茎溃疡病菌（简称DPM）、大豆拟茎点种腐病菌（简称PL）、大豆茎荚枯腐病菌（简称DPS）在大豆上经常造成复合侵然,容易造成误判。本研究从形态学特征、致病性检测以及ITS区序列分析3个方面鉴定了DPC和PL,同时也测序得到了DPM、DPS标准菌株的ITS区序列。在此基础上结合GenBank已发布的序列对这四种病菌的ITS序列比对分析,设计并合成了Diaporthe/Phomopsis通用引物探针和DPC、DPM、PL的TaqManMGB探针,经过反复试验各筛选出1套特异性引物和探针,成功建立了DPC、DPM、PL的实时荧光PCR检测方法,检测的灵敏度分别达到7fg/μl、6.5fg/μl、0.5pg/μl。对Fusarium virguliforme,F.tucumaniae,F.brasiliense,F.cuneirostrum四种大豆猝死综合症病菌和F.phaseoli菜豆根腐病菌进行ITS区和EF1-α区测序,结合Genbank已发布的序列同时进行比对,找出四个种间稳定的单核苷酸差异位点（其中未找到F.phaseoli和F.tucumaniae种间的差异位点）,利用SNP（单核苷酸多态性）等位基因分型试验成功的对这四个种间进行了区分鉴定,达到检测的目的。在处理技术方面选用了8种低毒杀菌剂,采用菌丝生长抑制法对DPC、DPM和PL进行了室内毒力测定,结果表明:50%多菌灵SC对供试三种病菌毒力最强,EC50值分别为0.118mg/l,0.112mg/l,和0.152mg/l。25%噁醚唑EC对南方茎溃疡病菌和拟茎点种腐病菌的毒力仅次于多菌灵,5%已唑醇EC对北方茎溃疡病菌抑菌效果也仅次于多菌灵,这3种药剂都可作为防治三种病害的有效杀菌剂。
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标签：大豆间座壳论文; 拟茎点综合症论文; 实时荧光论文; 大豆猝死综合症论文; 等位基因分型试验论文; 杀菌剂论文; 室内毒力测定论文;