论文题目: 体外共同培养的鼠骨骼肌成肌细胞和心肌细胞间连接的形态和电生理学研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 心脏外科
作者: 赖颢
导师: 赵强,王宜青,洪涛,陈昊
关键词: 多电极阵列,分化,免疫组化,透射电镜,心肌细胞,骨骼肌成肌细胞,共同培养
文献来源: 复旦大学
发表年度: 2005
论文摘要: 心肌梗死后存活心肌数量下降而导致最终的心力衰竭已成为心肌梗死患者死亡的主要原因。目前认为可通过细胞移植治疗缺血和心肌梗死等各种原因所致心肌细胞减少从而治疗心力衰竭。其中骨骼肌成肌细胞(myoblast)移植的研究时间较长,安全性最高,研究进展最快。以往大量的动物实验及临床研究已证明骨骼肌成肌细胞可以在正常的和受损伤的心肌中成活并改善受损心脏的功能,目前也已进入临床实验,但其改善心功能的机制尚不甚清楚。移植后“心肌细胞化”的骨骼肌成肌细胞相互之间以及骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间的连接,与心肌细胞间的闰盘连接有何异同尚不清楚;骨骼肌成肌细胞“心肌细胞化”的影响因素也不清楚。国内外以往对骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间连接的研究多为形态学研究,电生理方面的研究较少。本研究将新生SD大鼠的骨骼肌成肌细胞与心肌细胞在体外共同培养,从形态学和电生理学两个层面研究二者间连接的性质,并对可能的影响因素进行初步分析。整个实验共分五个部分。 第一部分 细胞的获取、培养及共同培养 目的 建立合适的骨骼肌成肌细胞与心肌细胞体外共同培养的模型。方法 新生第2-4天SD大鼠乳鼠8-12只/次,采用分次消化法获得心肌细胞;一次消化法获得骨骼肌成肌细胞;采用贴壁分离技术纯化;培养均选用含20%胎牛血清DMEM液(生长培养液)。在相差显微镜下观察、计数并绘制生长曲线。结果 在含20%胎牛血清的DMEM液中与心肌细胞共培养一周时,骨骼肌成肌细胞仍未出现融合、成熟的现象;经细胞生长曲线测算,与心肌细胞共同培养的骨骼肌成肌细胞数量增长速度要快于其单独培养时。结论 在含20%胎牛血清DMEM液中,骨骼肌成肌细胞与心肌细胞可共同培养,适合本研究需要;心肌细胞主要对骨骼肌成肌细胞增殖有促进作用,而对骨骼肌成肌细胞的融合、成熟无促进作用。 第二部分 共同培养的骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间连接的形态学研究
论文目录:
中文摘要(关键词)
英文摘要(关键词)
前言
正文
第一部分 细胞的获取、培养及共同培养
第二部分 共同培养的骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间连接的形态学研究
第三部分 骨骼肌成肌细胞与心肌细胞连接相关蛋白的定量RT-PCR研究
第四部分 骨骼肌成肌细胞“心肌细胞化”影响因素的免疫印迹分析
第五部分 多电极阵列系统电生理学研究
全文总结
参考文献—前言及正文部分
综述
参考文献—综述部分
致谢
附录
发布时间: 2005-09-19
参考文献
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