论文摘要
肠球菌作为人类和动物临床的重要病原菌,因其多样的固有耐药性、获得耐药性以及致病性而得到科研和医疗工作者的广泛关注。因此,对肠球菌耐药情况的调查以及耐药机制的研究事关动物乃至人类的健康,具有重要的公共卫生学意义。本研究在分离到102株猪源和人源肠球菌的基础上,进行肠球菌相关外排泵基因bcrB和lsa（E）的检测、质粒接合和电转化试验,细菌全基因组学测序,耐药基因遗传环境分析,overlaping PCR等。结果表明,猪源和人源肠球菌中bcrB耐药基因的检出率分别为57.5%（23/40）和14.3%（4/28）。而猪源和人源肠球菌中lsa（E）耐药基因的检出率分别为53.6%（37/69）和30.3%（10/33）。接合试验显示,杆菌肽锌耐药基因bcrB在猪源和人源肠球菌的接合效率分别为6.0×10-5和4.5×10-3；林可霉素-截短侧耳素-链阳菌素A耐药基因lsa（E）在猪源肠球菌的接合效率为3×10-6。电转化试验显示,lsa（E）耐药基因可以发生转化。bcrB基因环境显示,bcrABDR耐药基因簇位于两个直接重复的插入序列ISEnfaI内,提示bcrABDR耐药基因簇可能通过插入序列形成的复合型转座子进行转座而引起该耐药基因的水平扩散。lsa（E）基因环境中,我们发现了该基因与erm（B）、aadE、spc、lnu（B）等耐药基因共同存在,形成了一个多药耐药基因簇,其侧翼区存在着IS序列和转座酶基因,提示lsa（E）等耐药基因簇可通过整合或转座作用进行水平扩散。综上所述,杆菌肽锌外排泵基因bcrB和林可霉素-截短侧耳素-链阳菌素A外排泵基因lsa（E）在人源和猪源肠球菌中均有检出。bcrB和lsa（E）均可发生接合,而lsa（E）可以发生转化。进一步的耐药基因遗传环境分析显示,bcrB和lsa（E）均与插入序列关联,提示这些耐药基因可通过整合或转座的方式发生水平扩散,为临床上这些耐药基因的快速出现和流行提供了部分理论解释。