DEHP致小鼠过敏性哮喘的佐剂效应的生理学和组织学证据

论文摘要

DEHP是一种人造化学物质,通常添加到塑料制品中使得它们具有可塑性。富含DEHP的塑料商品包括墙壁遮盖物、桌布、地砖、家具、窗帘、橡胶软管、雨衣、婴儿纸尿裤、玩具、鞋、包装膜、电缆外皮、医疗软管和储血袋等。DEHP暴露能带来多种健康威胁,暴露途径不同DEHP产生的危害效应也不同。DEHP的致哮喘作用一直以来都是一个颇受争议的课题。有关DEHP对呼吸系统的毒性的研究主要集中在流行病学,Bornehag等人的研究虽然很好地揭示了室内环境中存在的DEHP能增加患哮喘风险,但是不能够给出直接而有力的证据。本实验中采用BALB/c小鼠为模型动物,该模型包括两个对照组和6个实验组,分别为生理盐水对照组、OVA致敏对照组、30μg/（kg·d）DEHP染毒组、300μg/（kg·d）DEHP染毒组、3000μg/（kg·d）DEHP染毒组、30μg/（kg·d）DEHP染毒OVA致敏组、300μg/（kg·d）DEHP染毒OVA致敏组、3000μg/（kg·d）DEHP染毒OVA致敏组。在建立急性哮喘模型的基础上,进行灌胃染毒,模拟DEHP的口头暴露途径,通过测定小鼠肺功能、肺组织切片病理观察、评价肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞浸润程度、测定小鼠肺组织中IL4和IFNy以及测定血清中总IgE和OVA-IgE研究DEHP对过敏性哮喘的作用和产生作用的机理。实验结果表明,在生理盐水组中,各DEHP暴露水平下小鼠的各项指标与生理盐水对照组相比没有差异,故DEHP单独暴露对哮喘没有明显的影响。在OVA致敏组中,各DEHP暴露水平小鼠的各项指标均有一定程度的变化,在最高浓度的DEHP暴露下,其气道高反应性明显加重,小鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞比例相比OVA对照组也有明显的升高。而这种增强效应在气道组织切片表现更为显著,最高浓度的DEHP暴露所引起的致敏小鼠气道改变最为突出,从图片中可以观察到小鼠气道表皮细胞破损严重,褶皱更加显著,使得气道腔变得狭窄,并且其中出现粘液阻塞气腔。肺组织中IL4/IFNγ、血清中总IgE实验结果也呈现类似趋势：当OVA致敏小鼠暴露3000μg/（kg-d）DEHP时,这些指标均出现显著上升。这些研究结果表明DEHP的致哮喘作用是通过佐剂效应产生的,这种佐剂效应可能与DEHP及代谢物引起的炎症和造成的生理紊乱有密切的关系。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1. 绪论
• 1.1 室内环境和过敏性哮喘
• 1.1.1 哮喘流行的因素
• 1.1.2 室内环境污染物与哮喘
• 1.2 环境污染物DEHP与过敏性哮喘
• 1.2.1 DEHP的性质、来源和在环境中的分布、转化
• 1.2.2 DEHP的人群暴露途径
• 1.2.3 DEHP的危害效应
• 1.2.4 DEHP的致哮喘作用
• 1.3 过敏性哮喘的成因
• 1.3.1 哮喘的细胞因素
• 1.3.2 哮喘的因子
• 1.4 研究哮喘的途径
• 1.4.1 大型动物模型的种类
• 1.4.2 小型鼠类模型的种类
• 1.4.3 急性炎症模型和慢性炎症模型
• 1.4.4 小鼠模型的条件选择
• 2 材料和方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 DEHP诱导的小鼠模型的建立
• 2.2.2 小鼠肺功能测定
• 2.2.3 肺泡灌洗液的回收和细胞计数
• 2.2.4 肺组织切片
• 2.2.5 肺组织中IL4、IFNγ含量的测定
• 2.2.6 血清中IgE和OVA-IgE含量的测定
• 2.2.7 统计学分析
• 3 实验结果
• 3.1 BALB/c小鼠肺功能实验结果
• 3.1.1 BALB/c小鼠Ri、Re和Clydn测定结果
• 3.1.2 BALB/c小鼠气道高反应性的多重分析结果
• 3.2 小鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞计数结果
• 3.3 小鼠肺组织切片结果
• 3.4 肺组织中IL4、IFNγ含量的测定结果
• 3.5 血清中总IgE和OVA-IgE含量测定结果
• 3.5.1 血清中总IgE含量的测定
• 3.5.2 血清中OVA-IgE含量的测定
• 3.6 DEHP致小鼠过敏性哮喘佐剂作用结果汇总
• 4 讨论
• 4.1 DEHP诱导的小鼠哮喘模型的建立
• 4.1.1 影响小鼠哮喘模型建立的因素
• 4.1.2 DEHP的浓度的选择
• 4.1.3 小鼠模型建立
• 4.1.4 实验结果比较
• 4.2 DEHP与过敏性哮喘的关系
• 4.2.1 DEHP与AHR和气道重塑的关系
• 4.2.2 DEHP与气道炎症的关系
• 4.3 DEHP致哮喘的佐剂效应的分子机理
• 4.3.1 内分泌干扰途径
• 4.3.2 TSLP通路
• 5 结论和展望
• 6 参考文献
• 附录1 主要英文缩写词
• 附录2 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢