论文摘要
第一部分尿液中植物雌激素暴露标志物检测方法的建立建立一种灵敏、可靠的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定方法,以检测人尿中植物雌激素（Phytoestrogens, PEs）及其代谢产物:大豆苷元（Dadzein,DAD）、染料木黄酮（Genistin,GEN）、雌马酚（Equol,EQU）、香豆雌酚（Coumestrol,COU）、柚皮素（Naringenin,NAR）、开环异落叶松树脂酚（Secoisolariciresinol,SEC）、肠二醇（Enterodiol,END）、肠内酯（Enterolactone,ENT）的浓度。尿液经β-葡糖苷酸酶水解在酸性条件下采用乙酸乙酯液-液萃取法提取目标化学物,浓缩后利用UPLC-MS/MS进行分离检测,以分析尿液中PEs的浓度。尿液中PEs在0.8-3000μg/L浓度范围内呈良好线性,线性相关系数r均大于0.99,加标回收率在82.8%-106.3%内,日内精密度为3.2%-10.3%,日间精密度为4.2%-13.4%。本方法稳定、可靠,灵敏度法高,可以快速准确地检测人尿液中PEs及其代谢产物的浓度,从而预测其在中国普通人群中的暴露水平。第二部分成年男性植物雌激素非职业暴露与生殖激素相关性研究本部分研究旨在探讨中国非职业暴露男性人群尿液中PEs及其代谢产物的内暴露水平是否与生殖激素的改变有关。研究对象为来自南京医科大学附属医院的948名符合入选标准的成年男性。通过UPLC-MS/MS,我们分析了研究对象尿液中的植物雌激素及其代谢产物的浓度,并进行了肌酐（CR）校正。同时分析了研究对象血清中生殖激素的水平,包括促卵泡释放激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、睾酮（T）、催乳素（PRL）。研究发现中国普通人群有较高水平的PEs暴露。研究结果提示:随着SEC、GEN、DAD暴露水平的增加,发生不育/生殖激素异常的危险度增加,而END、ENT的暴露水平增加,使得发生不育/生殖激素异常的危险度降低,结果提示植物雌激素对成年男性的生殖激素水平具有一定的影响。第三部分成年男性植物雌激素非职业暴露与甲状腺激素相关性研究本部分研究旨在探讨中国非职业暴露男性人群尿液中植物雌激素及其代谢产物的内暴露水平是否与甲状腺激素的改变有关。研究对象为来自南京医科大学附属医院的486名符合入选标准的中国男性。通过UPLC-MS/MS,我们分析了研究对象尿液中的植物雌激素及其代谢产物的浓度,并进行了肌酐（CR）校正。同时分析了研究对象血清中甲状腺激素的水平,包括甲状腺素（T4）、游离三碘甲腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）和促甲状腺激素（TSH）。研究结果提示:随着SEC、END的暴露水平的增加,发生甲状腺激素水平异常的危险度增加,结果提示PEs对成年男性的甲状腺激素水平具有一定的影响。第四部分成年男性植物雌激素非职业暴露与精液质量相关性研究本部分研究旨在探讨中国非职业暴露男性人群尿液中植物雌激素及其代谢产物的内暴露水平是否与生殖激素的改变有关。研究对象为来自南京医科大学附属医院的1077名符合入选标准的中国男性。通过UPLC-MS/MS,我们分析了研究对象尿液中的植物雌激素及其代谢产物的浓度,并进行了肌酐（CR）校正。同时分析了研究对象的精液质量,包括精液容积、精子浓度、一次射精总数、精子活动力等参数。研究发现中国非职业暴露人群有较高水平的PEs暴露。随着SEC、GEN、DAD暴露水平的增加,发生不育/精液质量异常的危险度增加,而END、ENT的暴露水平增加,使得发生不育/精液质量异常的危险度降低,研究结果提示:PEs高暴露水平可能导致精液质量的改变,结果提示PEs对成年男性的精液质量具有一定的影响。
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