大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤信号转导机制及白藜芦醇苷的保护作用

论文摘要

目的:探讨小肠缺血再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）所致的急性肺损伤（acute lung injury, ALI）信号转导机制和白藜芦醇苷（polydatin, PD）的保护机制。方法:224只健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠,随机分为假手术对照组（C组）、肠缺血再灌注I/R肺损伤组（I/R组）,I/R + NS组和I/R + PD治疗组。将大鼠腹腔打开后用暂时性夹持肠系膜上动脉（superior mesenteric artery, SMA）45分钟再松开的方法建立急性I/R肺损伤模型。在SMA松夹同时给予腹腔注射10 mg/kg PD为I/R + PD治疗组,注射生理盐水为I/R + NS组。假手术对照组的操作除不阻断SMA外其余操作与I/R组相同。分别于损伤后0h、0.5h、2h、6h、12h、24h、48h七个不同时间点处死实验大鼠留取大鼠肺标本保存待检。用苏木素-伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色肺组织观察其在光镜下的病理形态学变化;用烘干前后肺组织的湿、干重（W/D）称量法测量肺组织水肿情况;比色法检测肺组织髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活性变化;免疫组织化学染色法检测肺组织NF-κBp65和ICAM-1 （CD54）蛋白的表达;RT- PCR法检测肺组织HMGB1mRNA表达。结果:肺组织HE染色示假手术对照组仅有轻微的肺间质增宽改变,而I/R和I/R+NS组可见肺泡结构破坏,肺泡隔增宽且肺泡间隔炎性细胞浸润,肺泡腔内有渗出液、红细胞及渗出的炎性细胞,I/R+PD治疗组较I/R+NS组有明显改善。I/R组肺组织W/D值在0.5h、2h、6h、12h及24h升高与假手术对照组比较有显著统计学差异（P<0.01）。I/R组MPO活化表达升高,与假手术对照组在各时间点相比均有显著统计学差异（P<0.01）。I/R组ICAM-1（CD54）表达随肠I/R时间延长而增加,6h达峰值（160.67±21.62/HP）,此后稍有下降,24h轻度升高（107.83±20.40/HP）,与假手术对照组在各时间点相比均有明显升高（P<0.05）。I/R组MPO与ICAM-1之间存在较强的正相关（P<0.01）。I/R组NF-κBp65表达随肠I/R时间延长而增加,24h达峰值（169.00±22.65/HP）,较假手术对照组在各时间点表达有统计学差异（P<0.05）。I/R组HMGB1mRNA随肠I/R时间延长表达升高,24h达峰值（1.81±0.22）,较假手术对照组在2h、6h、12h、24h及48h表达有显著统计学差异（P<0.01）。I/R组NF-κBp6与HMGB1mRNA之间存在较强的正相关（P<0.01）。I/R+PD治疗组W/D值在0.5h、2h、6h及12h有显著降低,与I/R+NS组比较有显著统计学差异（P<0.01）。I/R+PD治疗组MPO活化表达较I/R+NS组在各时间点均有明显下降（P<0.05）。I/R+PD治疗组ICAM-1表达下降,在0.5h、2h、6h、12h及24h与I/R+NS组比较均有统计学差异（P<0.05）。I/R+PD治疗组NF-κBp65和HMGB1RNA表达均在2h后下降,与I/R+NS组比较有统计学差异（P<0.05）。结论:1.运用大鼠小肠缺血再灌注的方法成功建立了急性肺损伤动物模型。2. PMNs和ICAM-1表达有相互介导关系,而HMGB1肺内表达升高可能与NF-κB的转录调控有关。3. PD可能是通过减少PMNs和ICAM-1表达同时抑制NF-κB的激活,阻断其信号转导通路,下调HMGB1基因表达而实现对损伤肺组织的保护作用。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文：大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤信号转导机制及白藜芦醇苷保护作用
• 前言
• 第一部分 大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤的信号转导机制
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 第二部分 白藜芦醇苷对大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤的保护作用
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 全文总结
• 参考文献
• 图片资料
• 文献综述
• 致谢
• 攻读学位期间发表论文