解毒散结方对甲状腺功能亢进症的疗效及机制研究

论文摘要

目的：对一种治疗甲状腺功能亢进症的临床经验方（解毒散结方以下简称解毒方）进行较全面系统的疗效考察及机制研究,着眼甲亢临床伴随的主要问题如甲状腺肿大、甲亢性心脏病（hyperthyroidism heart disease,HHD）.甲亢性肝脏病、甲亢伴自身免疫性甲状腺炎,针对不同病症各个入手解决,寻找不同问题共性之处（共同指标的考察）,解决以上问题亦是对甲亢之根本解决,探讨药物对甲亢之确切疗效机制。为临床用药提供更好的指导及新药开发提供全面的药效学研究资料。方法：1.解毒方对左旋甲状腺素钠致大鼠甲亢阴虚模型的干预及治疗作用研究于上午10时进行,以左旋甲状腺素钠750μg/kg/日灌胃给予动物。一日一次,连续21天造成大鼠甲亢阴虚模型（甲亢性心脏病）,给药方式为干预给药（造模的同时给药）和治疗给药（造模后给药治疗一周）。结束后考察各组动物血清三碘甲腺原氨酸（T3）、血清四碘甲腺原氨酸（T4）、血清促甲状腺激素（TSH）含量；血清总蛋白、白蛋白、血脂、血糖；测定血浆胰岛素（INS）、血浆胰高血糖素（GC）、血浆肾上腺素（EPI）、血浆脑钠肽（BNP）含量；心脏组织匀浆测定cAMP.cGMP.SOD.MDA和甲状腺组织病理切片。2.解毒方对丙基硫氧嘧啶致大鼠甲状腺肿模型的作用研究每日上午十时灌胃0.15g/kg.d丙基硫氧嘧啶建立大鼠甲状腺肿模型,连续10d,同时于每日下午给予解毒方,持续15d,结束后考察各组动物前后体重变化,主要脏器系数,血清三碘甲腺原氨酸（T3）、血清四碘甲腺原氨酸（T4）含量,血清甲状腺球蛋白抗体（TG-Ab）.血清甲状腺微粒体抗体（TM-Ab）.血清甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）和甲状腺组织病理切片。3.解毒方对自身免疫性甲状腺炎大鼠自身抗体及组织病理结构的影响通过“碘化钠+甲状腺球蛋白”建立大鼠免疫性甲状腺炎模型,并灌胃解毒方药物,实验结束后考察指标有大鼠给药前后体重变化；血清T3.T4.TSH以及免疫球蛋白（IgG）、总补体（CH50）,甲状腺球蛋白抗体（TG-Ab）.甲状腺过氧化酶抗体（TPO-Ab）:WBC.RBC.HGB；观察甲状腺、胸腺组织形态学变化。4.解毒方对大鼠甲亢肝阳上亢模型的干预作用研究从造模第1天开始,给予大鼠灌胃附子汤10mL/（kg.d）,相当于生药2 g/（kg.d）,连续21天。在大鼠灌胃附子汤的第11天开始,同时给予优甲乐lmg/（kg.d）灌胃,连续10天,造型均安排在每天上午定时进行,解毒方药物为每日下午干预给药。考察指标有每周记录各组动物体重的变化；血清总蛋白、白蛋白、血脂、血糖、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）；血清T3.T4.TSH；血浆肾上腺素（EPI）、脑钠肽（BNP）；肝组织cAMP.cGMP.SOD.MDA:计算肝脏、心脏、甲状腺脏器系数。结果：1.解毒方三个剂量组均能够降低甲状腺激素,差异有极显著性（p<0.01）,且对该模型的干预作用优于治疗作用；解毒方干预组与治疗组生化指标与模型组比较差异均无统计学意义（p>0.05）；解毒方0.72g/kg剂量组能够升高SOD活性,差异具有统计学意义（p<0.05）,1.43g/kg剂量组能够降低心肌cAMP活性,差异有极显著性（p<0.01）；解毒方0.72g原生药/kg,1.43g原生药/kg剂量组对甲状腺组织炎症状态有较大的改善,能够较好的抑制炎性细胞的浸润；甲亢阴虚模型对照组脑钠素（BNP）、肾上腺素（EPI）与T3、T4成正相关,与TSH成负相关,胰岛素（INS）、胰高血糖素（GC）与T3.T4成负相关,与TSH成正相关,解毒方对血浆脑钠素（BNP）、胰岛素（INS）有降低趋势,1.43、2.86g（原生药）/吨剂量组对血浆胰高血糖素（GC）差异有显著性（p<0.05）,对血浆肾上腺素无明显影响。2.解毒方三个剂量（1.43、2.85、5.70g原生药/kg.d）组、模型对照组、正常对照组的动物体重比较差异均无显著性（p>0.05）；解毒方能够抑制丙基硫氧嘧啶引起的大鼠甲状腺肿,1.43、2.85 g原生药/kg.d剂量组甲状腺系数较模型组小（p<0.01）,差异有极显著性；与模型组比较,解毒方三个剂量组能够升高甲状腺激素,2.85g原生药/kg.d剂量组较显著T3、T4（p<0.05）,差异有显著性；与正常对照组比较,模型组TG-Ab含量有所降低,差异无显著性,TM-Ab,TPO-Ab亦差异无显著性,解毒方与模型对照组比较,三个剂量组TG-Ab.TM-Ab.TPO-Ab含量亦差异无显著性；与模型组比较,经灌胃解毒方药物后,1.43 g原生药/kg.d与2.85 g原生药/kg.d剂量组对甲状腺组织形态结构有较大的改善,使病变甲状腺腺体扩张,抑制腺上皮细胞肥大增生,腺上皮扁平,滤泡内胶体增多。3.正常对照组、模型对照组、解毒方三个剂量组比较,各组动物体重增长变化基本一致（p>0.05）,差异无统计学意义；解毒散结方三个剂量组、模型对照组、正常对照组比较细胞免疫（WBC.RBC.HGB）差异均无统计学意义（p>0.05）,提示该模型及药物对动物的细胞免疫无影响；与模型对照组比较,解毒方1.43、5.70g原生药/kg.d剂量组甲状腺系数差异有显著性（p<0.05）,解毒散结方2.85g原生药剂量组甲状腺系数差异有极显著性（p<0.01）,提示解毒散结方可能对甲状腺病理有改善作用；与模型对照组比较,解毒方1.43、2.85g原生药/kg.d剂量组T3差异有显著性（p<0.05）,提示解毒散结方可能对甲状腺功能有一定的改善作用；正常对照组、模型对照组、解毒散结方三个剂量组比较,各组动物特异性抗体（TG-Ab、 TPO-Ab）与非特异性抗体（IgG、CH50）差异无显著性（p>0.05）,差异无统计学意义,提示本实验研究中模型及药物均未对动物的特异性与非特异性指标产生影响；模型对照组有部分甲状腺滤泡及间质被淋巴细胞浸润,其腺上皮细胞未见增生、脱落病变。经灌胃解毒方三个剂量组药物,均能改变甲状腺细胞的淋巴细胞浸润炎性病变。模型对照组胸腺皮质变薄萎缩,胸腺细胞稀疏,淋巴细胞数目减少,皮髓质界限不清,皮质淋巴细胞明显减少,网状上皮细胞增多,有的淋巴细胞体积缩小,核固缩并有碎裂,经灌胃解毒方三个剂量组药物可较好的改善模型动物胸腺的炎性病变。4.解毒方低、中剂量范围内均降低血清T3、TSH;各组TP（总蛋白）、GLU（血糖）、TC（总胆固醇）、ALT（谷丙转氨酶）、ALB（白蛋白）指标与模型组比较差异均无统计学意义（p>0.05）；模型对照组TG（甘油三酯）、AST（谷草转氨酶）、ALP（碱性磷酸酶）较正常组高,且具有统计学意义（p<0.05）；研究中造模药物可能在受试药物的干预作用下引起ALT、AST升高,提示造模药物与爱试药物可能对肝细胞有毒性作用。模型组可见,见肝脏系数升高（p<0.01）、心脏系数升高（p<0.05）,差异具有统计学意义；给药组与模型组比较,给药组均能够降低肝脏、心脏系数,但差异无统计学意义；模型对照组脑钠素（BNP）、肾上腺素（EPI）与T3、TSH成负相关。提示甲亢伴肝脏病时可能会引发脑钠素（BNP）、肾上腺素的异常,从而对心脏内分泌功能及肾上腺素能神经功能产生影响。解毒散结方三个剂量组对脑钠素（BNP）、肾上腺素（EPI）均升高,且具有统计学意义。提示造模药物可能在受试物的干预作用下引发脑钠素（BNP）、肾上腺素的升高,从而影响心功能的内分泌及外周肾上腺素能神经功能。结论：通过对临床甲亢伴随的主要症状及指标考察,建立了相关的大鼠甲亢伴心脏病模型（甲亢阴虚模型）、大鼠甲状腺肿模型、甲亢伴肝病模型（甲亢肝阳上亢模型）、甲亢伴自身免疫性甲状腺炎模型,对不同疾病动物模型的共同指标的考察结果表明,解毒方能够较好的改善各个模型的的甲状腺功能,使甲亢高水平的甲状腺激素降低,进而改善甲状腺的组织结构使其病变程度降低,降低高水平的甲状腺激素对心肌细胞、肝脏细胞的氧化应激系统和细胞内第二信使物质损伤,有较好的保护功能,并对甲亢紊乱的糖、蛋、脂代谢功能及肾素一血管紧张素一醛固酮系统（RAAS）活性有所改善。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 中英文对照
• 前言
• 实验部分
• 一. 解毒方对左旋甲状腺素钠致大鼠甲亢阴虚模型的干预及治疗作用研究
• 1.1 实验目的
• 1.2 材料与方法
• 1.3 实验结果
• 1.4 结论与讨论
• 1.5 参考文献
• 二. 解毒方对丙基硫氧嘧啶致大鼠甲状腺肿模型的作用研究
• 2.1 实验目的
• 2.2 材料与方法
• 2.3 实验结果
• 2.4 结论与讨论
• 2.5 参考文献
• 三. 解毒方对自身免疫性甲状腺炎大鼠自身抗体及组织病理结构的影响
• 3.1 实验目的
• 3.2 材料与方法
• 3.3 实验结果
• 3.4 结论与讨论
• 3.5 参考文献
• 四. 解毒方对大鼠甲亢肝阳上亢模型的干预作用研究
• 4.1 实验目的
• 4.2 材料与方法
• 4.3 实验结果
• 4.4 结论与讨论
• 4.5 参考文献
• 五. 总结
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果