利用SSR分子标记划分玉米自交系种质类群的研究

论文摘要

本文以引进的91份玉米自交系为材料,采用SSR分子标记技术进行遗传多样性和杂种优势类群划分的研究。考虑出苗率、抗病、抗虫抗倒伏等因素,从91份引进的玉米自交系中选取30份自交系作为田间试验材料,利用自交系的10个性状的田间调查结果进行方差分析和聚类分析。对形态学方法和SSR分子标记类群划分结果进行了比较,主要结果如下:1.从20对SSR引物中筛选出多态性较好的引物6对。这6对SSR引物在供试材料中共检测出35个等位基因变异,每对引物检测出的等位基因数在4—8个之间,平均为5.8个,多态信息量变幅为0.46-0.68,平均为0.58;相异系数变化范围为0.0605-1.089。2.利用SSR标记,以0.54为阈值将供试91份玉米自交系划分为六大类群:第Ⅰ类群16份,第Ⅱ类群19份,第Ⅲ类群7份,第Ⅳ类群13份,第Ⅴ类群24份,第Ⅵ类群12份。3.建立了一套优化的SSR-PCR体系。①:预变性94℃,4min;②:变性94℃,1min;③:退火温度55-65℃（以引物Tm而定）,1min;④:延伸72℃,2min;⑤:复延伸72℃,10min;其中步骤2-4的循环数为30-35,以材料而定。4.根据自交系的10个田间性状的调查结果对30份材料进行聚类分析,以3.5为阈值将供试材料分为6个类群。

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Abstract

1 引言

1.1 玉米起源与现状

1.2 玉米种质资源概述

1.2.1 玉米种质资源的重要性

1.2.2 国内外玉米种质资源研究概况

1.2.3 玉米种质资源存在的问题

1.2.4 玉米种质类群划分方法

1.3 SSR 在玉米育种中的应用

1.4 本研究的目的及意义

2 材料和方法

2.1 试验材料

2.1.1 参试玉米自交系

2.1.2 试剂及溶液配制

2.1.3 引物

2.2 试验方法

2.2.1 表型聚类法分析

2.2.2 SSR 分析

3 试验结果分析

3.1 利用表型聚类法对玉米自交系的类群划分

3.1.1 方差分析

3.1.2 聚类分析

3.2 利用SSR 分子标记对玉米自交系的类群划分

3.2.1 SSR 反应体系和反应程序的优化

3.2.2 SSR 引物的筛选

3.2.3 SSR 扩增及其多态性分析

3.2.4 SSR 聚类分析

3.3 SSR 分子标记和表型聚类法的比较

4 讨论

4.1 玉米种质类群划分方法

4.2 SSR-PCR 体系优化

4.3 SSR 引物的选择

4.4 利用SSR 标记划分玉米种质类群的探讨

5 结论

致谢

参考文献

附表

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