LXR激动剂调节小鼠巨噬细胞脂质内稳态及其炎症因子分泌的实验研究

论文摘要

【目的】肝X受体（liver X receptors, LXRs）是配体依赖性的核转录因子,可调控多个与脂质代谢及炎症反应有关的重要蛋白质的表达,在维持胆固醇内稳态和调节炎症反应中发挥重要作用。LXRs由DNA结合域及配体结合域构成。LXRs与维甲酸X受体（retinoid X receptors, RXRs）形成的异源二聚体可被LXRs配体和/或RXRs配体激活,通过与靶基因上的肝X受体反应元件（LXR response elements, LXRE）结合,调节靶基因转录。LXRs的配体包括天然的氧化甾醇（oxysterol）如:20（S）-羟基胆甾醇、22（R）-羟基胆甾醇、24（S）-羟基胆甾醇、27-羟基胆甾醇、24（S）,25-环氧胆固醇以及人工合成的T-1317、GW3965。LXRs激动剂一方面可调节胆固醇和脂肪酸代谢,另一方面可调节机体先天性免疫反应。LXRs激动剂通过上调巨噬细胞ABCA1、ApoE的表达,促进巨噬细胞中胆固醇的外流;并可下调巨噬细胞内一些促炎症因子如:iNOS、COX-2、MMP-9的表达。第三军医大学药学教研室采用高立体选择性化学合成法,以猪去氧胆酸为原料高效合成了LXRs激动剂3β-羟基-5α, 6α-环氧胆酸甲酯（methyl 3β-hydroxy- 5α,6α-epoxycholante, MHEC）。本实验采用两种LXR激动剂（MHEC和T-1317）为实验用药,对培养的小鼠巨噬细胞样细胞株RAW 264.7细胞进行体外实验研究。探讨LXR激动剂对小鼠巨噬细胞ABCA1蛋白、清道夫受体以及TNF-α、IL-6的影响。【方法】应用免疫组化S-P法检测LXR激动剂对RAW 264.7细胞ABCA1蛋白表达的影响。用荧光标记的ac-LDL（Dil-Ac-LDL）孵育细胞,通过流式细胞术检测细胞内荧光强度,分析LXR激动剂对RAW 264.7细胞清道夫受体活性的影响。应用夹心法ELISA检测细胞培养上清中TNF-α及IL-6水平,分析LXR激动剂对ox-LDL诱导的TNF-α及IL-6产生和分泌的影响。【结果】1. MHEC和T-1317两种LXRs激动剂均可显著促进RAW 264.7细胞ABCA1蛋白的表达;9-cRA与LXRs激动剂联合作用时,ABCA1蛋白表达的增加更为显著。2. MHEC和T-1317两种LXRs激动剂均可使RAW 264.7细胞的清道夫受体活性显著降低。RXRs激动剂9-cRA与T-1317联合作用时,清道夫受体活性有更显著的降低;

论文目录

• 英文缩写词一览表
• 英文摘要
• 中文摘要
• 论文正文 LXR 激动剂调节小鼠巨噬细胞脂质内稳态及其炎症因子分泌的实验研究
• 前言
• 第一部分 LXR 激动剂对 RAW 264.7 细胞 ABCAl 蛋白表达的影响
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 LXR 激动剂对 RAW 264.7 细胞清道夫受体活性的影响
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分 LXR 激动剂对 RAW 264.7 细胞 TNF-α和 IL-6 产生和分泌的影响
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 全文总结
• 致谢
• 附图
• 参考文献
• 文献综述 肝 X 受体激动剂抗动脉粥样硬化作用研究进展
• 参考文献