论文摘要
目的研究高糖毒性对INS-1细胞胰岛素基因及其转录因子PDX-1和MafA表达的影响,以及高糖情况下,NF-κB抑制剂PDTC（吡咯烷二硫代氨基甲酸）对胰岛素、PDX-1和MafA表达的保护作用,从而探讨“糖毒性”可能的生化机制,为糖尿病的治疗提供新的靶点。方法以含11.1mmol/L葡萄糖的RPM1-1640培养基培养INS-1细胞,当细胞生长至80%左右的融合时,再分别将细胞转入含有4.0mmol/L葡萄糖（NG组）、16.7mmol/L葡萄糖（HG组）及16.7mmol/L葡萄糖+50umol/L PDTC（HG+P组）的RPMI-1640培养基中继续培养48小时,离心收集细胞,Trizol提取总RNA,逆转录生成cDNA,然后以real-time PCR法分别检测胰岛素基因及转录因子PDX-1和MafA的mRNA水平。结果HG组与NG组比较,胰岛素mRNA的表达下降了64.9%（p<0.05）;PDX-1 mRNA的表达下降了82.3%（p<0.01）;MafA mRNA的表达下降了80.9%（p<0.01）。HG+P组与HG组相比,胰岛素mRNA的表达则提高了6.67倍（p<0.05）;PDX-1 mRNA的表达提高了7.52倍（p<0.05）;MafA mRNA的表达提高了5.70倍（p<0.01）;而与NG组相比,胰岛素、PDX-1和MafA mRNA的表达均无显著差异（p>0.05）。结论高浓度葡萄糖可导致胰岛素基因及PDX-1和MafA表达下降,而NF-κB抑制剂PDTC可以恢复胰岛素基因及PDX-1和MafA的表达。研究结果提示:“糖毒性”可以通过激活INS-1细胞内的NF-κB途径,使胰岛素转录因子PDX-1和MafA的表达下降,最终导致胰岛素基因表达下降。
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