木脂素对MCF-7乳腺癌细胞抗增殖作用及其机制的研究

论文摘要

目的：研究从植物红楠中提取的木脂素对MCF-7乳腺癌细胞的抗增殖作用,并初步探讨其作用机制。方法：实验分为对照组和实验组,对照组：不加木脂素的MCF-7乳腺癌细胞；实验组：加不同浓度木脂素的MCF-7乳腺癌细胞,每组细胞分别培养24、48和72 h。倒置显微镜观察MCF-7乳腺癌细胞生长情况,应用MTT方法检测对照组和实验组各时间段的细胞生存率,并采用免疫细胞化学方法检测Bax、Bcl-2、p21、p27及c-myc蛋白的表达,流式细胞技术检测实验组与对照组细胞周期及细胞凋亡率。结果：（1）形态学观察：倒置显微镜观察,对照组MCF-7乳腺癌细胞增殖能力随培养时间的延长明显增强,而用木脂素处理的实验组MCF-7乳腺癌细胞增殖明显受抑制,细胞凋亡数明显增高。（2）MTT检测结果表明,实验组MCF-7乳腺癌细胞生存率明显降低,具有浓度和时间依赖性,与对照组相比均有显著性差异（P<0.001）。（3）免疫细胞化学染色结果,在24、48和72h时对照组乳腺癌细胞Bcl-2、c-myc蛋白的表达呈强阳性,Bax、p21及p27蛋白的表达呈弱阳性,而实验组24、48和72h时乳腺癌细胞Bcl-2、c-myc蛋白的表达呈弱阳性,Bax、p21及p27蛋白的表达呈强阳性,与对照组相比均有显著性差异（P<0.001）。（4）利用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期结果,对照组MCF-7乳腺癌细胞凋亡率为0.01%,实验组MCF-7乳腺癌细胞凋亡率在48和72h时分别为23.55%和29.03%,与对照组相比均有显著性差异（P<0.001）。细胞周期检测结果,G1期、G2期、S期细胞百分比对照组为55.6%、16.17%和28.23%；实验组48 h和72 h时分别为66.63%、9.67%和23.69%：64.25、11.13和24.62%。结论：木脂素对MCF-7乳腺癌细胞具有明显的抗增殖作用,其机制之一是通过上调Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白的表达,从而促进细胞凋亡；同时通过增强p21及p27蛋白的表达,抑制c-Myc蛋白的表达,调控细胞周期,抑制MCF-7乳腺癌细胞从G1进入S期,从而阻止肿瘤细胞的DNA合成。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 1.3 统计学处理
• 第二章 结果
• 2.1 MCF-7乳腺癌细胞的形态学改变
• 2.2 MCF-7乳腺癌细胞对数生长期测定结果
• 2.3 MTT法检测MCF-7乳腺癌细胞的抗增殖作用
• 2.4 免疫细胞化学方法检测蛋白的表达水平
• 2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 附图
• 致谢
• 参考文献
• 综述