survivin蛋白在胃癌及癌前病变中的表达和意义

论文摘要

背景和目的：胃癌是最常见的消化道肿瘤之一,其发病率居肿瘤的第二位,死亡率高居首位,我国是胃癌高发地区之一,年死亡率为16/10万,高发区达60/10万。在国外,胃癌死亡率在不同种族、不同国家和同一地区不同时期有显著性差异,发病率较高的地区是日本,南非,其次是东欧等。胃癌严重威胁着人类的生命健康。如何有效防治胃癌的发生发展一直是消化界学者的研究重点。众多研究表明,胃癌的发生是一个缓慢的过程,部分病人可能经历了由正常粘膜、慢性浅表性胃炎（chronic superficial gastritis, CSG）、慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis,CAG）、慢性萎缩性伴轻度不典型增生、慢性萎缩性伴中度不典型增生,慢性萎缩性伴重度不典型增生、癌变多步骤的过程。这过程可长达数年或数十年,众多基因及分子改变的累积与这一演变过程密切相关。目前,人们对胃癌发生的分子生物学机制认识尚不清楚,探讨其防治的分子机制及应用是研究的热门课题。有研究表明,对细胞凋亡的抑制是胃癌形成过程中的一个重要机制,通过延长有基因突变细胞的寿命而导致胃癌的发生。细胞凋亡（apoptosis）是一个由基因主动决定自动结束生命的过程,受到遗传机制决定的严格的程序性调控,也称细胞编程性死亡,该过程受凋亡促进因子和凋亡抑制因子的共同调节。survivin是一种凋亡抑制基因,定位于不稳定性较高的染色体17q25上,其编码的survivin蛋白是由142个氨基酸组成,分子量为16.5kD的蛋白质,以同源二聚体形式存在,表达于细胞周期的G2/M期。是迄今发现分子量最小、作用最强的凋亡抑制因子之一,具有调节细胞周期等多种生物活性。survivin的生物学功能主要是通过抑制凋亡通路下游的caspase-3、caspase-7从而对抗紫杉醇、Fas、Bax、细胞色素和caspase诱导的凋亡,对抗G2/M期细胞凋亡的诱导,通过有丝分裂促进转化细胞的异常增殖,最终导致肿瘤的发生；还可促进肿瘤新生血管的生成,为肿瘤的浸润生长提供。survivin能够选择性表达于恶性肿瘤组织,而癌旁正常组织并不表达,并且可以促进细胞的恶性转化和抑制细胞凋亡,是某些恶性肿瘤发生的重要因素之一。survivin的表达增高在肿瘤发展的早期就已出现,并随着肿瘤的生长浸润而表达逐渐增强,这与survivin能够抑制肿瘤细胞的凋亡、促使肿瘤发展有关。本研究之目的是测定survivin蛋白在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎及不典型增生和胃癌中的表达程度,探讨survivin蛋白在胃癌的发生发展中的分子生物学角色,并为胃癌的早期诊断、评估预后、判断复发和基因治疗提供一个新的途径。材料和方法：1.收集南方医科大学南方医院消化科及佛山市三水区人民医院消化内镜室诊断并经病理确诊的病例。分为慢性浅表性胃炎组、慢性萎缩性胃炎组、慢性萎缩性胃炎伴轻度不典型增生组、慢性萎缩性胃炎伴中度不典型增生组、胃癌组,共5组,每组40例。其中,慢性浅表性胃炎组,男性29例,女性11例,平均年龄（51.10±13.63）岁；慢性萎缩性胃炎组,男性25例,女性15例,平均年龄（52.35±14.62）岁；慢性萎缩性胃炎伴轻度不典型增生组,男性28例,女性12例,平均年龄（52.13±14.47）岁；慢性萎缩性胃炎伴中度不典型增生组,男性32例,女性8例,平均年龄（54.60±12.26）岁；胃癌组,男性29例,女性11例,平均年龄（58.75±15.20）岁。组间年龄与性别统计学无明显差异,各组间具有可比性。2.所有标本组织均经10%中性福尔马林固定,梯度酒精脱水浸蜡,常规包埋切片、烤片,HE染色。survivin免疫组化染色按福州迈新生物技术开发有限公司提供的试剂盒说明书操作。采用已知的阳性片作阳性对照。用PBS代替一抗作阴性基本对照。结果：1.慢性浅表性胃炎组40例,survivin阳性表达3例,平均分值0.075±0.267,阳性率7.5%；慢性萎缩性胃炎组40例,survivin阳性表达18例,平均分值0.600±0.744,阳性率45%；慢性萎缩性胃炎伴轻度不典型增生组40例,survivin阳性表达30例,平均分值2.075±1.980,阳性率70%；慢性萎缩性胃炎伴中度不典型增生组40例,survivin阳性表达38例,平均分值4.225±2.402,阳性率95%；胃癌组40例,survivin阳性表达39例,平均分值5.750±3.614,阳性率97.5%。2.胃癌组40例中,survivin阳性表达39例,其中弱阳性（+）19例,中度阳性（++）10例,强阳性（+++）10例。按组织学类型（及分化程度）,高分化腺癌2例,survivin表达弱阳性（+）1例,中度阳性（++）1例,平均分值2.500±0.707；中分化腺癌8例,survivin表达弱阳性（+）2例,中度阳性（++）3例,强阳性（+++）3例,平均分值8.750±3.495；低分化腺癌22例,survivin表达阴性1例,弱阳性（+）11例,中度阳性（++）4例,强阳性（+++）7例,平均分值5.522±3.654；粘液腺癌2例,弱阳性（+）1例,中度阳性（++）1例,平均分值3.200±0.837；印戒细胞癌5例,弱阳性（+）3例,中度阳性（++）2例,平均分值6.000±0.000。结论：1.survivin在慢性萎缩性胃炎组（18,45%）、慢性萎缩性胃炎伴轻度不典型增生（25,75%）、慢性萎缩性胃炎伴中度不典型增生（38,95%）、胃癌（39,97.5%）中阳性表达率显著高于慢性浅表性胃炎（3,7.5%）,差异有统计学意义（p<0.05）。2.胃癌（39,97.5%）与慢性萎缩性胃炎伴中度不典型增生（38,95%）阳性表达率无显著性差异（p=0.252）。3.survivin在胃癌中的阳性表达与性别及肿瘤的大小和组织的分化程度无明显关系（t=0.311 p=0.785;t=1.733 p=0.091;t=0.413 p=0.682;F=0.734 P =0.575）。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料与方法
• 一、主要试验材料和试剂
• 二、实验方法
• 三、结果判定
• 四、统计学方法
• 结果
• 一、survivin在慢性萎缩性胃炎及其伴不同程度不典型增生中的表达
• 二、survivin在不同组织类型胃癌中的表达
• 讨论
• 全文小结
• 参考文献
• 中英文缩略语词表
• 致谢
• 统计学证明