切花百合新品种体细胞胚胎发生研究

论文摘要

百合（Lilium spp.）为百合科（Liliaceae）百合属（Lilium）多年生草本植物,球根类,属单子叶植物,英文名Lily。百合因花色丰富,花香怡人,花型典雅优美而被大众所喜爱,近些年随着国民经济的发展,花卉市场的繁荣,我国对观赏百合的需求量逐年增加。本研究以几个切花百合优良新品种花器官为外植体,研究了百合体细胞胚（胚状体）再生的影响因素与技术体系,建立了OT系百合（OT Hybrids Lily）优良品种“黄天霸”和东方杂交百合（Oriental Hybrids Lily）优良品种“西伯利亚”的体细胞胚胎发生再生技术。研究取得如下主要结果:1.最适外植体选择百合花器官不同部位外植体对愈伤组织形成有极显著性影响,花丝为胚性愈伤组织诱导的最适外植体材料。花丝外植体出愈率高,污染率低,诱导时间短,诱导愈伤组织具胚性。2.愈伤组织诱导培养基的优化黄天霸百合花丝愈伤组织诱导、增殖中,生长素NAA极显著（出愈率F=109.4917**,愈伤组织比例F=19.5731**）,细胞分裂素6-BA显著（出愈率F=5.8604*,愈伤组织比例F=5.4571*）。NAA 1.0 mg·L-1诱导、增殖效果最佳,6-BA 2.0 mg·L-1诱导效果最佳,6-BA 0.2 mg·L-1增殖效果最佳。西伯利亚百合花丝愈伤组织诱导中,细胞分裂素6-BA（F=7.3726**）极显著,生长素2,4-D（F=4.5101*）、NAA（F=3.7378*）显著。在愈伤组织增殖中2,4-D（F=5.660*）、6-BA（F=5.0625*）、NAA（F =4.4782*）均显著。3.胚状体（体细胞胚）的诱导黄天霸体细胞胚诱导中,2,4-D（F=79.4807**）、KT（F=38.4990**）、6-BA（F=38.2930**）均极显著,最佳培养基为MS + 2,4-D 1.0 mg·L-1 + 6-BA 1.0 mg·L-1 + KT 0.2 mg·L-1（胚性愈伤组织比例=0.7905aA）。西伯利亚体细胞胚诱导,2,4-D（F=55.9290**）、KT（F=33.1020**）、6-BA（F =15.1952**）均极显著,最佳培养基为MS + 2,4-D 2.0 mg·L-1 + KT 0.2 mg·L-1 + 6-BA 1.0 mg·L-1。品种间体细胞胚胎发生存在差异,虽然激素诱导效应由大到小依次都为2,4-D﹥KT﹥6-BA,但相比之下黄天霸百合花丝愈伤组织增殖胚性细胞更旺盛。经体细胞胚成胚培养,百合胚性愈伤组织成胚能力平均为332.8个/g,并可成功获得百合球形胚、心形胚、盾型胚、子叶形胚等不同生长阶段的胚状体。4.体细胞胚萌发成苗的研究IBA对体细胞胚萌发成苗有显著性影响,百合体细胞胚芽成苗的最佳培养基为MS+ 0.2 mg·L-1 6-BA +1.0 mg·L-1 IBA。5.百合生根及结鳞激素NAA对百合生根及结鳞有显著性影响,低浓度的NAA(0.1 mg·L-1)有利于百合鳞茎的增大和根系的伸长。MS大量元素浓度对百合生根及结鳞有显著性影响,有利于百合生根及结鳞的MS大量元素浓度依次为1/2MS>1/4MS>MS。琼脂浓度对百合生根有显著性影响,7.0g·L-1为最适宜琼脂浓度。6.驯化移栽驯化移栽后,幼苗成活率达91.67%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 百合属植物概述
• 1.2 百合再生体系的建立
• 1.2.1 愈伤组织再生体系
• 1.2.2 直接分化再生体系
• 1.2.3 体细胞胚（胚状体）再生体系
• 1.2.4 原生质体再生体系
• 1.2.5 生殖细胞受体体系
• 1.3 研究的目的和意义
• 第二章 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 植物材料
• 2.1.2 主要药品试剂
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 百合花器官不同部位外植体的愈伤组织诱导
• 2.2.2 百合花丝愈伤组织诱导培养基的优化
• 2.2.3 百合花丝愈伤组织胚状体的诱导
• 2.2.4 体细胞胚萌发成苗试验
• 2.2.5 百合生根及结鳞
• 2.2.6 驯化移栽
• 2.3 数据处理
• 第三章 结果与分析
• 3.1 百合愈伤组织诱导
• 3.1.1 百合不同花器官外植体对愈伤组织诱导的影响
• 3.1.2 百合花丝诱导愈伤组织培养基的优化
• 3.2 百合花丝愈伤组织胚状体（体细胞胚）的诱导
• 3.2.1 黄天霸胚性愈伤组织的诱导
• 3.2.2 西伯利亚胚性愈伤组织的诱导
• 3.2.3 西伯利亚与黄天霸胚性愈伤组织诱导的比较
• 3.2.4 百合胚状体（体细胞胚）的成胚培养
• 3.3 IBA 对百合体细胞胚萌发成苗的影响
• 3.4 百合生根及结鳞
• 3.4.1 激素NAA 对百合生根及结鳞的影响
• 3.4.2 MS 大量元素浓度对百合生根及结鳞的影响
• 3.4.3 琼脂浓度对百合生根的影响
• 3.5 驯化移栽
• 第四章 结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.1.1 百合不同花器官外植体对愈伤组织诱导的影响
• 4.1.2 百合花丝诱导愈伤组织培养基的优化
• 4.1.3 百合花丝愈伤组织胚状体（体细胞胚）的诱导
• 4.1.4 IBA 对体细胞胚萌发成苗的影响
• 4.1.5 百合生根及结鳞
• 4.1.6 驯化移栽
• 4.2 讨论
• 参考文献
• 图版说明
• 图版
• 致谢
• 作者简介