论文摘要
目的：老年性痴呆，又称阿尔茨海默病（AD），是发生于老年前期或老年期，以进行性记忆等认知障碍为主要症状，同时伴有精神行为异常的神经退行性疾病。其特征性临床表现为严重的学习记忆功能下降、分析判断能力衰退、情绪改变、行为失常、甚至意识模糊，严重影响了老年人的日常生活和社会活动能力，使其生命质量下降。世界人口正在加速变老。第五次人口普查表明，我国已经成为老龄国家。到本世纪中叶，我国60岁以上老年人将达4亿左右，届时每4个人中就有1个老年人。为此，包括我国在内的各国政府均加快了防治老年性痴呆的研究工作。而有效改善AD患者的学习记忆能力，提高其生存质量，是AD研究的重点和突破口所在。AD的发病机制复杂，许多信号分子在其中发挥重要作用，多个信号通路参与此过程，而临床上现有的针对AD发病的单基因或单靶向治疗药物并不能有效改善或控制患者症状，疗效短暂而局限，且副作用明显。针对单靶向药物对抗复杂疾病的缺点，近年来科学研究者提出并尝试将多靶向治疗策略应用于AD治疗。这是因为复杂疾病的发病往往由多种信号通路参与，而单靶向药物作用忽视了细胞内生物大分子之间的相互影响及信号通路中构成的网络系统的相互联系。并且有研究者认为，保护细胞膜和细胞内各种信号转导途径免受Aβ等的伤害，有可能成为改善AD患者认知功能和防治AD的突破。针灸以其疗效确切、作用持久、无副作用而受到医学界的普遍关注。近年来，针灸疗法在防治AD方面的临床和实验研究取得很大进展，对比发现针刺疗效不亚于中西药物，甚至在某些方面有优于西药的趋势。同时，针灸疗法所具有的多靶点、多途径、多层次整体治疗优势，也正符合现代医学针对复杂疾病提出的多靶向治疗策略。因此，深入研究针灸对AD的干预作用，对进一步理解衰老和针刺机制，推动临床研究具有重要意义。为此，本实验从学习记忆的相关中枢信号通路入手，进一步探讨针刺治疗AD的作用机制，为AD的针灸临床提供一定的实验依据。方法：将SD大鼠按随机数字表分为4组，即正常组、假手术组、模型组、电针组。采用双侧海马一次性注射聚集态Aβ25-35制备AD大鼠模型，电针组选取双侧“肾俞”穴、双侧“内关”穴和“大椎”穴，接G6805-Ⅱ型电针治疗仪，选用2Hz连续波，强度为1mA，通电20min，每天1次，每周6次，共治疗2周。采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力的变化；采用HE染色，光镜下观察各组大鼠海马形态学的变化；采用分光光度法检测各组大鼠Glu的变化；采用放射免疫法检测各组大鼠海马cAMP的变化；采用免疫组化法检测各组大鼠海马PKA、CREB蛋白表达的变化；采用原位杂交法检测各组大鼠海马NMDAR1mRNA的变化。并进一步分析电针干预对上述各项指标的影响。结果：①定位航行实验中，假手术组与正常组相比，无明显差异（P＞0．05）；与假手术组比较，模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长，差异有显著性（P＜0．01）；与模型组相比，电针组大鼠的学习记忆能力有明显的提高（P＜0．05）。②空间探索实验中，假手术组与正常组相比，无明显差异（P＞0．05）；与假手术组比较，模型组大鼠跨越平台的次数减少，差异有显著性（P＜0．01）；与模型组相比，电针组大鼠记忆平台的能力有明显提高（P＜0．05）。③HE染色：光镜下观察可见正常组和假手术组大鼠海马各区神经元染色清晰，呈圆形、椭圆形或锥形，排列整齐紧密。核呈圆形，大而清晰，核仁明显，形态完整。模型组大鼠海马注射针道附近可见细胞增生、聚集，核小深染，可能为胶质细胞；CA1区、CA3区锥体细胞数量较假手术组明显减少，局部神经元缺失，残留的神经元排列松散不规则，多数细胞胞核固缩，核仁欠清晰，整个细胞深染成红色，部分呈现出多齿形、月牙型等凋亡形态，并伴有胶质细胞增多。电针组能明显改善上述神经元损伤，使海马神经细胞排列较整齐，核固缩现象改善。④分光光度法检测结果显示：模型组大鼠海马Glu含量明显高于假手术组，差异有显著性（P＜0．01）；与模型组相比，电针组大鼠海马Glu含量有明显的下降（P＜0．05）。⑤放射免疫法检测结果显示：模型组大鼠海马cAMP的含量明显降低，与假手术组比较有显著性差异（P＜0．01）；电针组大鼠海马cAMP含量与模型组比较有显著提高（P＜0．05）。⑥免疫组化法检测结果显示：模型组大鼠海马CA1、CA3区PKA的表达明显低于假手术组，差异有显著性（P＜0．01）；与模型组相比，电针组大鼠海马CA1、CA3区PKA表达明显增多（P＜0．05）。⑦免疫组化法检测结果显示：与假手术组比较，模型组大鼠海马CA1、CA3区CREB的表达明显降低，有显著性差异（P＜0．01）；电针组大鼠海马CA1区CREB的表达与模型组比较有显著提高（P＜0．05）。⑧原位杂交法检测结果显示：模型组大鼠海马CA1、CA3区NMDAR1mRNA阳性细胞平均灰度值与假手术组相比显著升高（P＜0．01）。电针组大鼠海马CA1、CA3区NMDAR1mRNA阳性细胞平均灰度值与模型组相比明显降低（P＜0．01）。结论：双侧海马一次性注射Aβ25～35制备的大鼠模型成功的模拟了AD的行为学特征，海马神经细胞中Glu-NMDAR信号转导通路与cAMP-PKA-cREB信号转导通路参与了AD大鼠学习记忆障碍的过程，而电针“肾俞”穴、“内关”穴和“大椎”穴可以显著提高AD大鼠的学习记忆能力。其作用机制可能是通过以下途径实现的：通过降低Glu的神经毒性，保护海马神经细胞，并上调NMDAR1-mRNA的表达，充分活化NMDAR，改善Glu-NMDAR信号通路的传导；同时提高海马神经细胞cAMP、PKA及CREB的表达，激活其cAMP-PKA-CREB信号通路，从而加强LTP，改善学习记忆的能力。本实验也再次证明针刺具有多靶点、多途径、多层次、整体治疗的特点，能够有效的减轻AD大鼠海马神经细胞的损害，促使学习记忆相关信号通路正常转导，提高AD学习记忆能力。
论文目录
相关论文文献
- [1].利肺片对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的影响[J]. 中成药 2020(02)
- [2].慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的建立与评价[J]. 中国实验动物学报 2020(02)
- [3].国内外大鼠和小鼠微生物、寄生虫检测标准的比较[J]. 实验动物与比较医学 2020(02)
- [4].武夷岩茶对酒精性肝损伤大鼠的护肝作用[J]. 武夷学院学报 2020(03)
- [5].参芎葡萄糖注射液对大鼠肺动脉高压的治疗作用及其机制[J]. 中国生物制品学杂志 2020(06)
- [6].口服蛋氨酸饲料致大鼠心室重塑的研究[J]. 天津医科大学学报 2020(03)
- [7].腹部推拿对结肠慢传输型便秘大鼠的治疗效果[J]. 新疆医科大学学报 2020(04)
- [8].基于UHPLC-Q-Exactive MS分析鉴定隐丹参酮在大鼠体内的代谢产物[J]. 质谱学报 2020(04)
- [9].针刺对慢性温和刺激大鼠粪便代谢的影响[J]. 针灸临床杂志 2020(07)
- [10].两种不同方法制造简易大鼠挤压伤模型的研究[J]. 宁夏医科大学学报 2020(08)
- [11].酸枣仁水提物对焦虑大鼠症状的改善及其对肠道菌群的影响[J]. 现代食品科技 2019(11)
- [12].早期肠内营养对重症肺炎大鼠免疫功能的影响分析[J]. 中国医学前沿杂志(电子版) 2017(01)
- [13].右美托咪定后处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 临床医学工程 2017(02)
- [14].滨蒿内酯对大鼠实验性变应性鼻炎的疗效及机制[J]. 贵州医科大学学报 2017(01)
- [15].黄连解毒汤对营养性肥胖大鼠的毒性研究[J]. 光明中医 2017(10)
- [16].三七总皂甙对骨折大鼠血管内皮生长因子基因扩增及蛋白表达水平影响的研究[J]. 临床医药文献电子杂志 2017(51)
- [17].小花棘豆中毒对大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴α-甘露糖苷酶的影响[J]. 福建农林大学学报(自然科学版) 2016(01)
- [18].法舒地尔对百草枯致大鼠肺纤维化的干预作用[J]. 浙江实用医学 2016(01)
- [19].富血小板血浆对创伤性颅脑损伤大鼠神经功能的保护作用[J]. 吉林大学学报(医学版) 2016(05)
- [20].白虎汤对全身炎症反应综合征大鼠炎症因子的影响[J]. 四川中医 2015(01)
- [21].长期饮用淡化海水对大鼠血脂影响[J]. 中国公共卫生 2015(07)
- [22].辛伐他汀预处理对大鼠神经源性肺水肿的作用及其机制[J]. 中国动脉硬化杂志 2015(10)
- [23].猫捉大鼠[J]. 中小学音乐教育 2020(07)
- [24].西维来司钠对大鼠脑出血保护作用机制的实验研究[J]. 现代养生 2017(10)
- [25].药对藿香-陈皮配伍前后对功能性消化不良大鼠的初步药效学研究[J]. 健康之路 2017(07)
- [26].VND3207药物对中子辐照大鼠脏器指数的影响[J]. 中国原子能科学研究院年报 2016(00)
- [27].韭菜洋葱有助睡眠[J]. 益寿宝典 2017(14)
- [28].毒瘾也“世袭”?雄性大鼠毒瘾遗传给后代[J]. 创新时代 2017(08)
- [29].脉冲射频治疗对带状疱疹后神经痛模型大鼠脊髓背角自噬的影响[J]. 临床麻醉学杂志 2019(12)
- [30].麝香保心丸对高尿酸血症大鼠内皮功能的影响[J]. 中西医结合心脑血管病杂志 2019(23)