论文摘要
目的:通过建立近交系大鼠SD及Wistar之间的肾移植急性排斥反应模型,检测肾移植受体鼠外周血清白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平的变化,研究苦参碱(Matrine,Mat)对大鼠肾移植术后急性排斥反应的抑制作用及机制,并研究苦参碱和环孢菌素A(cyclosporin A,CsA)之间是否存在协同效应,为苦参碱的进一步开发和在器官移植领域的临床应用提供确切的理论依据,期望苦参碱的使用能减少CsA的用量,减轻其毒副作用,减轻患者的经济负担。 方法:用近交系大鼠SD作为肾移植供体,近交系Wistar大鼠为肾移植受体,用改良肾移植术建立同种异基因/同基因原位肾移植急性排斥反应实验动物模型,术后按施加的处理因素不同分为7组,Ⅰ组:生理盐水(N.S)组,12只,术后不用免疫抑制剂,术后当天起腹腔注射(i.p)生理盐水(N.S,容积等量);Ⅱ组:Mat组,12只,术后当天起用Mat10mg.kg-1.d-1,ip;Ⅲ组:CsA组,12只,术后当天起用CsA2.5mg.kg-1.d1;Ⅳ组:Mat+CsA组,12只,Mat10mg.kg-1.d-1+CsA2.5mg.kg-1.d-1,ip;Ⅴ组:同基因移植组,12只,为Ⅰ-Ⅳ组同种异基因肾移植的手术对照组,建立近交系Wistar-to-Wistar同基因肾移植模型,术后给予N.S 1m1kg-1.d-1,ip;Ⅵ组:假手术组(Sham surgery control),为Ⅰ-Ⅳ组肾移植的手术对照组,近交系Wistar大鼠12只,麻醉、切开、等手术过程同上,但不做异体肾移植,只做自体移植,术后给予NS 1m1kg-1.d-1,ip;Ⅶ组:正常对照组(药物溶媒对照组,normal control),为Ⅰ-Ⅵ组手术的对照组,近交系Wistar大鼠12只,不手术,每天给予N.S 1m1kg-1.d-1,ip,正常饲养。从每组中随机抽取半数,正常饲养,观察大鼠的存活时间、每日尿量及泌尿持续时间,另一半于术后第7天处死,留取外周血2ml抗凝,2m1分离血清,置-70℃冰箱保存,并留取完整移植肾或正常肾用福尔马林浸泡,以备统一检测。应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中的IL-2和TNF-α
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