论文摘要
类风湿关节炎(RA)是一种病因不明的以慢性多关节炎为特征的系统性自身免疫性疾病,RA的诊断主要依靠临床表现,类风湿因子(RF)是目前诊断RA的唯一的血清学指标。RF可以出现在近80%的RA患者中,但在其他风湿性疾病和少数正常人的血清中仍然可以检测到,故RF不利于RA的诊断。近年来,人们相继发现抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)等较RF更为特异的自身抗体,他们可以与含有瓜氨酸的底物特异性结合。2000年,国外首次报道人工合成含有瓜氨酸的环肽(CCP)可用于ELISA检测,检测到的抗CCP抗体对RA具有很高的特异性(94%~98%),并可在60%~75%的患者中出现。本研究通过检测抗CCP抗体在类风湿关节炎中的敏感性和特异性,抗CCP抗体与RF及各临床指标间的关系,以探讨抗CCP抗体对类风湿关节炎早期诊断的应用价值。实验材料与方法一、资料来源选取来自2005年10月至2006年10月中国医科大学第二临床学院门诊及住院的RA及其他风湿病患者共61例,均符合国内或国际相应诊断标准。其中男性12例,女性49例,年龄14~74岁,平均49岁。另外选取我院体检中心的正常成人8例作为正常对照组。所有入选病例均记录患者同期的临床、实验室资料,内容包括性别、年龄、病程、关节表现、实验室常规检测的各项血清学检查、X线检查等。所有入选病例抽取3ml静脉血离心分离血清后放入-20℃冰箱中保存待用。二、主要试剂ELISA检测试剂盒,PBS缓冲液等。三、主要仪器酶标仪,低速离心机,低温冰箱,恒温箱,刻度加样器等。四、实验方法1、应用ELISA法检测抗CCP抗体,所用试剂盒为德国欧盟医学实验诊断有限公司提供的第二代抗CCP抗体诊断试剂盒。严格按照试剂盒说明书进行操作。抗CCP抗体浓度>5Ru/ml判定结果为阳性,≤5Ru/ml者为阴性。2、应用速率散射比浊法(Beckman公司提供仪器)检测RF和C反应蛋白(CRP),RF≥20u/ml为阳性,CRP≥8mg/1为增高,应用自然沉降法检测血沉(ESR),≥20mm/h为增快。五、统计学处理用SPSS 10.0软件包进行统计学分析。采用四格表计算抗CCP抗体的敏感性、特异性等各项评价诊断试验的评价指标,两组间抗CCP抗体阳性率比较采用X2检验;抗CCP抗体与病程、RF、ESR及CRP等临床和实验室指标间的关系采用Spearman相关分析。所有假设检验的检验水准定为0.05。结果1、抗CCP抗体的检测结果为抗CCP抗体对RA的敏感性为74.91%,特异性为94.74%,抗CCP抗体在RA患者及非RA患者中、在RA患者和其他风湿病患者中的表达均具有显著差异(P<0.01)。2、RF检测结果为RF对RA的敏感性为77.42%,与抗CCP抗体差异无显著性,特异性为76.31%,显著低于抗CCP抗体(P<0.05)。3、早期RA患者抗CCP抗体的阳性率与中晚期RA患者的抗CCP抗体阳性率分别为61.54%和83.33%,二者相比没有显著性差异(P>0.05)。4、抗CCP抗体与RF、ESR有相关性(P<0.05),而与CRP、免疫球蛋白无相关性(P>0.05)。结论1、抗CCP抗体对RA具有良好的敏感性和很高的特异性,在RA的早期可以出现,对RA的早期诊断具有重要意义。2、联合检测抗CCP抗体、RF及其它实验室指标可以提高抗CCP抗体的临床应用价值。
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