论文摘要
随着膜片钳技术的发展,许多研究发现,低渗牵张能调控细胞膜上众多离子通道,激活多种信号转导途径。我室以往的研究表明,在豚鼠胃窦环行平滑肌细胞上,低渗牵张激活了电压依赖性钙通道、容积敏感氯通道、毒蕈碱电流、钙激活钾通道、延迟整流性钾电流等;其中钙激活钾通道的激活是由于细胞内钙离子浓度的升高引起,那么,细胞内钙的释放又由什么信号介导的呢?我们以前的实验证明不是由IP3介导的,因此我们必须考虑其它第二信使。近来许多研究表明,低渗牵张能激活细胞膜上的磷脂酶而分解膜磷脂,产生花生四烯酸等不饱和脂肪酸,花生四烯酸（arachidonic acid,AA）能调控细胞膜上的离子通道,介导细胞内的信号转导。本实验的目的就是探讨是否AA介导了低渗牵张增强钙激活钾电流。 本实验以豚鼠为实验动物,用Ⅱ型胶原酶急性分离其胃窦环行肌单细胞,分离的单细胞大多数结构完整且保持了良好的生理功能。我们应用传统全细胞模式的膜片钳技术,研究了AA在低渗牵张增强豚鼠胃窦环行平滑肌细胞钙激活钾电流(calcium activated potassium current,IK（Ca）)中的作用及机制。 本文的主要实验结果如下: 一、AA在低渗牵张增强胃平滑肌IK（Ca）中的作用 1.低渗牵张和AA对IK（Ca）及自发性瞬间外向钾电流的作用 在传统全细胞模式下,当电极内液含0.1μM EGTA时,钙激活钾电流IK（ca）可被去极化刺激所激活。细胞膜电位钳制在-60mV,用单个脉冲刺激使去极化至+60mV,每15s采样一次,时程400毫秒。IK（ca）在200mOsm低渗液灌流139秒后开始升高,稳定时在+60mV显著升高达168.25±16.11%;给药10μMAA165秒后,IK（ca）开始升高,稳定时在+60mV显著升高达158.53±20.48%。 在相同模式下,膜电位钳制在-20mV,可以记录到自发性瞬间外向钾电流
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