腺样囊性癌临床病理分析及Glut-1、PI3K/AKT信号通路的表达和意义

论文摘要

背景和目的：发生在耳鼻咽喉气管部位的腺样囊性癌（adenoid cystic carcinoma, ACC）极为少见,生长位置较为隐蔽,早期症状不典型,早期确诊较为困难。与大涎腺的腺样囊性癌一样,耳鼻咽喉气管部位的腺样囊性癌生长较为缓慢但侵袭性强,常沿神经、血管生长,易复发和转移,手术与放化疗联合治疗的方法尚达不到理想的治疗效果,预后极差。不同的病变部位、病理类型、TNM分期、治疗方法、切缘等因素差异可直接影响ACC患者的预后,但影响其预后的真正原因尚不明了。因此探讨腺样囊性癌浸润与转移的发病机制及预后的相关因素,寻求新的诊断和治疗方法有良好的应用前景。随着免疫学、分子生物学技术的不断发展,从分子水平探讨ACC发生、发展的机制,对于认识ACC的发病机制、判断预后、发现潜在的治疗靶点具有重要意义。ACC与其它恶性肿瘤一样,恶性细胞所处的生理环境能量相对匮乏,呈现局部缺氧状态,并引起肿瘤细胞因子的过度表达。恶性肿瘤细胞的葡萄糖代谢率较高,这种现象已被正电子发射计算机断层（Positron emission tomography, PET）检查所证实,PET/CT也证实ACC中存在此现象。恶性肿瘤细胞对葡萄糖的代谢率增高与葡萄糖转运蛋白（Glucose transporter protein, Glut）及基因的异常表达有关,其中葡萄糖转运蛋白-1（Glut-1）在恶性肿瘤细胞的葡萄糖吸收和转运中起主导作用,Glut-1的异常表达与多种信号转导通路有关,而PI3K/Akt在Glut-1表达的调节中起重要作用。PI3K/Akt是一种对生长和增殖有重要作用的异二聚体酶,是近年来发现的生长因子信号转导途径。研究发现在人类许多肿瘤中都有PI3K-Akt的过度表达。从恶性肿瘤葡萄糖能量供应的层面已有研究发现,PI3K/Akt途径的激活与Glut-1表达的增加有关。我们的前期研究已经发现,Glut-1的异常表达与头颈部癌的生物学行为有关,与头颈部癌的预后差有关,可以作为靶向治疗的新方法之一,并且我们已通过反义寡脱氧核苷酸技术阻断喉癌Hep-2细胞Glut-1的表达,能抑制喉癌细胞的葡萄糖吸收的影响及Hep-2细胞增殖,可能是喉癌治疗的一种理想靶标。目前,Glut-1在肿瘤发生机制中的研究,多集中于头颈部较常见肿瘤类型如鳞状细胞癌,而在腺样囊性癌中Glut-1的表达情况与临床生物学特性的关系研究较为少见,尤其是腺样囊性癌中PI3K/Akt信号通路调控Glut-1表达的研究更为少见,国内尚未见有文献报道。本课题在前期研究基础上,从癌细胞能量供应的层面,采用免疫组织化学方法检测耳鼻咽喉气管腺样囊性癌组织中Glut-1及PI3K和磷酸化Akt （p-Akt）蛋白的表达,回顾性分析患者的临床病例特点,探讨Glut-1及PI3K和p-Akt蛋白表达与耳鼻咽喉腺样囊性癌生物学行为的关系。材料与方法：收集1993.1～2010.2期间浙江大学医学院附属第一医院耳鼻咽喉科收治的14例耳鼻咽喉气管腺样囊性癌病例进行回顾性分析,观察临床病理参数对患者生存状态和预后的影响。并应用免疫组织化学EliVisionTM法检测14例耳鼻喉气管腺样囊性癌病例以及对照组15例炎性病变（5例鼻息肉组织及10例声带息肉）、14例良性肿瘤（5例鼻腔良性神经鞘瘤、1例耵聍腺瘤、1例喉部良性软骨瘤、7例鼻腔内翻性乳头状瘤）的Glut-1. PI3K和p-Akt的蛋白表达情况,14例腺样囊性癌病理学分类分别为筛孔型、管状型及实体性,临床病理学分期在T1、T2、T3期；显微镜下计数阳性细胞,结果进行统计学分析。采用SPSS15.0软件,各临床病理因素的关系因素及Glut-1、PI3K和p-Akt之间的关系用χ2检验、Fisher精确概率法,以α=0.05为差异有统计学意义检验水准,相关性分析采用Kappa检验（即一致性检验）,如果kappa)0.75,提示两个指标的一致性非常好,即相关性高,kappa值在0.4～0.75之间,两个指标间的一致性中等,kappa<0.4,两个指标间一致性较差。结果：1、14例腺样囊性癌（ACC）患者,男性6例,女性8例,年龄32～80岁,平均54岁。位于外耳道者4例,鼻腔3例,鼻窦3例,喉部3例,气管1例。T1 6例、T2 5例or T3 3例,所有患者均未发现淋巴结及远处转移。全部患者均行手术治疗,10例患者术后进行了放射治疗。本组资料显示,10例患者术后进行了放射治疗,随访至今仍分别存活6年9个月（病例1）,4年3个月（病例3）,15年（病例4）,24年（病例5）,9年5个月（病例6）,5年7个月（病例7）,1年5个月（病例9）,5年8个月（病例11）,6年6个月（病例12）,7年（病例14）,8例(（病例1、3、4、6、9、11、12、14）放射剂量不清,2例放射剂量50Gy。在放射的10例中,接受手术+放疗后2年（病例6）、5年（病例5）出现局部复发,行多次手术,现1例带瘤生存（病例6）,1例无瘤生存（病例5）,其余8例均无复发,说明放射治疗控制局部复发有一定效果；3例无术后放射治疗,其中1例随访24个月后失访,1例随访半年后失访,‘1例随访至今存活1年8个月；1例第一次在外院手术后9个月,在我院再次手术,术后失访,有无术后放疗情况不清楚。本组鼻腔-鼻窦及外耳道ACC局部复发率高,喉及气管ACC未见复发,无颈淋巴结转移及远处转移。2、14例耳鼻喉气管腺样囊性癌组织中Glut-1阳性表达率为35.7%（5/14）PI3K阳性表达率为28.6%（4/14）,p-Akt阳性表率为71.4%（10/14）；对照组：15例炎性病变Glut-1、PI3K和p-Akt均为阴性表达；14例良性肿瘤中,Glut-1均呈阴性表达,1例PI3K、2例p-Akt呈阳性表达,阳性表达率分别为7.14%（1/14）；14.3%（2/14）。耳鼻喉气管腺样囊性癌组织组Glut-1, PI3K、p-Akt阳性表达率明显高于对照组,差异有显著性（P<0.05,P<0.01）。ACC中Glut-1和PI3K表达、Glut-1p-Akt表达、p-Akt和PI3K表达,经kappa检验,kappa值分别为0.186、0.364、0.276,说明Glut-1、PI3K、p-Akt表达之间相关一致性较差。结论：临床病理特点：1、本组资料显示：本组鼻腔-鼻窦及外耳道ACC局部复发率高,喉及气管ACC未见复发,无颈淋巴结转移及远处转移。2、本组资料显示：第一次的确诊及第一次彻底手术治疗、术后放疗对控制局部复发有一定效果。3、本组资料显示：腺样囊性癌极易误诊,腺样囊性癌应作为耳鼻咽喉气管部位疾病的鉴别诊断Glut-1、PI3K/AKT信号通路的表达和意义：1、本组资料显示Glut-1表达增高与腺样囊性癌的发生可能有关。2、PI3K/Akt信号传导通路的异常活化与腺样囊性癌的发生有关。

论文目录

• 致谢
• 中文摘要
• Abstracts
• 目次
• 前言
• 第一部分 14例耳鼻咽喉气管腺样囊性癌临床病理分析
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 耳鼻喉气管腺样囊性癌Glut-1、PI3K/AKT信号通路的表达和意义
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 作者简历及在学期间主持课题和发表论文
• 附录