HIF-1α、SOCS-3、Bax在心脏性猝死心肌中的表达和甲醛固定石蜡包埋尸检组织中提取DNA的研究

论文摘要

REGⅣ基因在结肠癌HCT-8细胞增殖、侵袭和转移中的作用及临床意义研究目的：探讨人再牛基因Ⅳ（Regenerating geneⅣ, REGIV）在结肠癌细胞系HCT-8中的表达,以及对结肠癌HCT-8细胞增殖、侵袭和转移中的影响及临床意义。方法：采用基因克隆和基因重组等分子生物学方法,从结肠癌细胞系HCT-8克隆REGⅣ基因,构建全序列过表达REGⅣ质粒,并转染至HCT-8细胞。通过MTT、细胞侵袭和转移实验,观察HCT-8细胞过表达REGⅣ基因后对细胞增值、侵袭和转移的影响。并观察HCT-8细胞经转染沉默REGⅣ基因的小干扰RNA质粒（REGⅣRNAi-2）,对细胞增值、侵袭和转移的影响。结果：通过酶切、测序与比对,REGⅣ基因的全序列质粒构建成功。通过荧光显微镜观察计数,转染REGⅣ基因的HCT-8细胞转染率为±55%,且REGⅣmRNA表达显著增加（P<0.05）,REGⅣ蛋白表达显著增高（P<0.05）：转染REGⅣ基因质粒后,HCT-8细胞增殖能力显著增强,表现为细胞数量明显增加（P<0.05）、细胞PCNA的表达显著增高（P<0.05）；HCT-8细胞经转染REGⅣ基因质粒后,其转移和侵袭能力也明显增强（P<0.05）。但HCT-8细胞转染特异性阻断REGⅣ基因的小干扰RNA REGⅣRNAi-2质粒,HCT-8细胞的REGⅣmRNA的明显下降（P<0.05）,其蛋白表达也显著降低（P<0.05）,同时其细胞增殖能力明显减弱（P<0.05）,转移和侵袭能力也明显降低（P<0.05）。结论：REGⅣ基因可调控结肠癌细胞的增殖、转移和侵袭能力,该基因可能在结肠癌的发生、发展中具有重要的作用和临床意义。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一部分
• 第1章 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 第2章 结果
• 2.1 PCDNA3.1-REG Ⅳ质粒的构建
• 2.2 HCT-8细胞PCDNA3.1-REG Ⅳ质粒的转染
• 第3章 讨论
• 第二部分
• 第1章 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 第2章 结果
• 2.1 质粒转染后结肠癌HCT-8细胞REG Ⅳ mRNA表达
• 2.2 质粒转染后结肠癌HCT-8细胞REG Ⅳ蛋白的表达
• 2.3 质粒转染后结肠癌HCT-8细胞增殖影响
• 2.4 质粒转染后结肠癌HCT-8细胞PCNA表达的影响
• 2.5 质粒转染后结肠癌HCT-8细胞侵袭,转移的影响
• 第3章 讨论
• 第三部分
• 第1章 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 第2章 结果
• 2.1 质粒转染后前列腺癌PC-3细胞REG Ⅳ mRNA表达
• 2.2 质粒转染后前列腺癌PC-3细胞REG Ⅳ蛋白的表达
• 2.4 质粒转染后前列腺癌PC-3细胞增殖的影响
• 第3章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 综述参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间研究成果