B淋巴细胞刺激因子治疗性疫苗的研究

论文题目: B淋巴细胞刺激因子治疗性疫苗的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 生物化学与分子生物学

作者: 薛晓畅

导师: 张英起,颜真,韩苇

关键词: 淋巴细胞刺激因子,包涵体,复性,动物模型,实验性变态反应性脑脊髓炎,类风湿性关节炎

文献来源: 第四军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: B淋巴细胞刺激因子(B Lymphocyte Stimulator,BLyS)是1999年由瑞士和美国科学家发现的肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)家族的一个新成员。该分子含有285个氨基酸,属于Ⅱ型跨膜蛋白,编码区位于染色体13q32-34。BLyS主要由T细胞和树突状细胞等髓系来源的细胞分泌。BLyS以膜结合以及可溶性两种方式存在于机体中,两者均具有生物学活性。迄今为止,已经发现了三种受体可以与BLyS结合,分别为BCMA、TACI和BAFF-R,由于缺少信号转导序列,它们被划归为Ⅲ型膜蛋白。其中前两者也可以与其他的分子结合,而BAFF-R则为BLyS特异性的受体,这些受体仅位于B细胞膜表面,使得BLyS的生物学活性——刺激B淋巴细胞的成熟以及增殖,有了高度的选择性。研究表明,BLyS在B细胞的存活和功能调节方面发挥着重要作用,它可以延长B细胞存活时间、促进其增殖,从而导致B细胞增生和自身免疫狼疮样变化的出现。BLyS的过度表达是发生自身免疫性疾病,尤其是系统性红斑狼疮的重要因素之一。但是,对于BLyS的作用机制还不明了。

论文目录:

缩略语表

中文摘要

英文摘要

前言和文献回顾

1 B淋巴细胞刺激因子的研究进展

1.1 BLyS的发现

1.2 BLyS的结构

1.3 BLyS受体

1.4 BLyS的生物学活性

1.5 BLyS与疾病

2 关于包涵体

2.1 包涵体形成的原因

2.2 如何减少包涵体的形成

2.3 包涵体的分离及溶解

2.4 包涵体的复性

2.5 包涵体复性以后的纯化

正文

1 引言

2 实验材料

2.1 主要仪器

2.2 菌株与质粒

2.3 酶类

2.4 主要生化试剂与材料

3 实验内容

第一部分基因克隆、表达及实验室规模纯化

1 实验方法

1.1 寡核苷酸合成

1.2 基因克隆及载体构建

1.3 感受态细胞制备

1.4 Western-blot印迹分析

1.5 工程菌鉴定

1.6 蛋白质的实验室规模纯化

2 实验结果

2.1 基因扩增及克隆

2.2 工程菌鉴定

2.3 实验室规模纯化

第二部分纯化工艺放大及产物鉴定

1 实验方法

1.1 工程菌发酵

1.2 蛋白质纯化

1.3 纯化蛋白质部分指标测定

2 实验结果

2.1 纯化工艺放大

2.2 纯化产物鉴定

第三部分中和抗体的诱导及疾病动物模型的试验性研究

1 实验方法

1.1 TT-BLyS中和抗体的诱导

1.2 诱导抗体中和活性测定

1.3 TT-BLyS用于疾病动物模型的预防

2 实验结果

2.1 TT-BLyS多克隆抗体的制备及特异性鉴定

2.2 诱导抗体中和活性测定

2.3 TT-Blys对疾病模型大鼠的作用

4 讨论

5 小结

参考文献

个人简历

发表主要学术论著

致谢

发布时间: 2005-07-19

参考文献

[1].1、整体重组酵母活菌治疗性疫苗抗HBV实验研究　2、人脐带血来源树突状细胞抗HBV治疗实验研究[D]. 蔡大川.重庆医科大学2004
[2].人白细胞介素8治疗性疫苗的研制[D]. 侯登勇.第四军医大学2005
[3].HSP65-HBV多表位融合蛋白乙肝治疗性疫苗的研制[D]. 王华.吉林大学2006
[4].丙型肝炎治疗性DNA疫苗的实验研究[D]. 陈佳玉.吉林大学2006
[5].阿尔茨海默症疫苗研究和乙肝疫苗临床免疫评价体系研究[D]. 王爽.中国农业大学2013
[6].减毒鼠伤寒沙门菌为载体的幽门螺杆菌治疗性疫苗实验研究[D]. 刘开云.第三军医大学2011
[7].截短的乙型肝炎表面抗原分子的表达及其抗原特性的研究[D]. 凌宁.重庆医科大学2002
[8].靶向DC的治疗性乙肝疫苗实验研究[D]. 张萍.中国人民解放军军事医学科学院2009

B淋巴细胞刺激因子治疗性疫苗的研究

猜你喜欢