Livin、Smac及PRND在白血病中的表达及意义

论文摘要

目的:Livin是凋亡抑制蛋白家族（inhibitor of apoptosis proteins,IAPs）的最新成员,含有一个BIR结构及一个锌指结构,它通过抑制Smac和caspase-3、7、9酶活性而产生抗凋亡作用。Livin在某些肿瘤组织中表达,且其高表达常预示肿瘤病人预后不良。Livin在白血病患者中表达及意义尚无明确结论。Smac （second mitochodria-derived activator of caspase, Smac）是由线粒体释放入胞浆的促凋亡蛋白,通过拮抗IAP对caspase-3,caspase-7,caspase-9的抑制作用而诱导凋亡。叠朊蛋白是一种新发现的朊蛋白样糖蛋白,在成人生殖系统及某些肿瘤组织中表达,PRND为叠朊蛋白的编码基因,临床研究还很局限。本研究旨在检测Livin、Smac及PRND mRNA在白血病中表达并分析其临床意义。方法:应用半定量逆转录-聚合酶链反应（simi-quantify reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）方法检测了91例急性白血病患者（50例新近诊断急性白血病患者、10例复发患者和31例持续完全缓解期患者）及17例慢性粒细胞白血病患者的骨髓或外周血单个核细胞Livin、Smac及PRND mRNA表达水平。21名健康人为正常对照组。结果1各组中Livin mRNA表达情况1.1 Livin mRNA在急性白血病中表达情况新近诊断急性白血病（AL）患者组Livin mRNA阳性表达率为84%（42/50）,表达水平为0-2.473,平均表达水平为0.485,正常对照组阳性表达率为42.9%（9/21）,表达水平0-0.285,平均表达水平为0.073,AL组表达水平明显高于正常对照组（P<0.05）。复发组Livin mRNA阳性表达率为100%（10/10）,表达水平0.075-1.256,平均表达水平0.536,高于正常对照组（P<0.05）,高于AL组,但与AL组差别无统计学意义（P>0.05）。持续完全缓解组Livin mRNA阳性表达率为51.6%（16/31）,表达水平为0-0.782,平均表达水平0.211,低于AL组及复发组（P值均小于0.05）,比正常对照组高,但无统计学差异（P>0.05）。急性髓系白血病（AML）患者组Livin mRNA阳性表达率为82.5%（33/40）,表达水平为0-2.473,平均表达水平为0.446,急性淋巴细胞白血病（ALL）患者组Livin mRNA阳性表达率为90%（9/10）,表达水平0-2.209,平均表达水平0.639,ALL组表达水平高于AML组,但两组间差别无统计学意义（P>0.05）,两组表达水平均高于正常对照组（P值均小于0.05）。Livin mRNA在AML组M2、M3、M4、M5、M6各亚型间表达水平有差别,在M4中表达水平相对其他亚型较高,但各亚型间差别无统计学意义（P>0.05）。1.2 Livin mRNA在慢性粒细胞白血病中表达情况慢性粒细胞白血病慢性期（CP）患者组Livin mRNA阳性表达率81.8%（9/11）,表达水平0-0.552,平均表达水平0.224,正常对照组阳性表达率为42.9%（9/21）,表达水平0-0.285,平均表达水平为0.073,CP组Livin mRNA表达水平高于正常对照（NC）组（P<0.05）,加速/急变期（AP和BP）患者组阳性表达率为83.3%（5/6）,表达水平为0-0.768,平均水平为0.288,高于正常对照组（NC）组（P<0.05）。AP和BP组Livin mRNA表达水平高于CP组,但差别无统计学意义（P>0.05）。2各组中Smac mRNA表达情况2.1 Smac mRNA在急性白血病中表达情况新近诊断急性白血病患者组Smac mRNA阳性表达率为70%（35/50）,表达水平为0-1.564,平均表达水平为0.503;正常对照组阳性表达率为23.8%（5/21）,表达水平为0-0.460,平均表达水平为0.056;AL组Smac mRNA表达水平明显高于正常对照组（P<0.05）。复发组Smac mRNA阳性表达率为70%（7/10）,表达水平为0-1.378,平均表达水平为0.560,高于正常对照组（P<0.05）,但与AL组相比差别无统计学意义（P>0.05）。持续完全缓解组Smac mRNA阳性率为32.3%（10/31）,表达水平为0-1.232,平均表达水平0.250,低于AL组（P<0.05）,高于正常对照组,但差别无统计学意义（P>0.05）。新近诊断急性白血病患者中AML组Smac mRNA阳性表达率为70%（28/40）,表达水平为0-1.564,平均表达水平为0.503;ALL组Smac mRNA阳性率为70%（7/10）,表达水平为0-0.996,平均表达水平0.502, AML组表达水平高于ALL组,但差别无统计学意义（P>0.05）,两组表达水平均高于正常对照组（P值均小于0.05）。Smac mRNA在AML组M2、M3、M4、M5、M6各亚型间表达水平有差别,在M3中表达水平相对其他亚型较高,但各亚型间差别无统计学意义（P>0.05）。2.2 Smac mRNA在慢性粒细胞白血病中表达情况慢性粒细胞白血病慢性期（CP）患者组Smac mRNA阳性表达率为45.5%（5/11）,表达水平为0-0.997,平均水平为0.299,高于正常对照（NC）组（P<0.05）。加速/急变期（AP和BP）患者组Smac mRNA阳性表达率为66.7%（4/6）,表达水平为0-1.392,平均水平为0.571,高于NC组（P<0.05） ,与CP组相比,差别无统计学意义（P>0.05）。3各组中PRND mRNA表达情况3.1 PRND mRNA在急性白血病中表达情况新近诊断急性白血病患者组PRND mRNA阳性表达率为88.0%（44/50）,表达水平为0-2.306,平均表达水平0.387;正常对照组阳性率为57.1%（12/21）,表达水平为0-0.336,平均表达水平为0.070,AL组表达水平高于正常对照组,差别有统计学意义（P<0.05）。复发组PRND mRNA阳性表达率90%（9/10）,表达水平为0-1.262,平均表达水平为0.526,高于正常对照组（P<0.05）,但与AL组相比差别无统计学意义（P>0.05）。持续完全缓解组PRND mRNA阳性表达率77.4%（24/31）,表达水平0-1.213,平均表达水平为0.341,高于正常对照组（P<0.05）,低于AL组,但与AL组差别无统计学意义（P>0.05）。新近诊断急性白血病患者中AML组阳性PRND mRNA表达率87.5%（35/40）,表达水平0-2.306,平均表达水平为0.356,ALL组阳性表达率90%（9/10）,表达水平0-0.925,平均表达水平为0.512,ALL组PRND mRNA表达水平高于AML组,但差别无统计学意义（P>0.05）,AML组和ALL组表达水平均明显高于正常对照组（P值均小于0.05）。PRND mRNA在AML组M2、M3、M4、M5、M6各亚型间表达水平有差别,在M2中表达水平相对其他亚型较高,但各亚型间差别无统计学意义（P>0.05）。3.2 PRND mRNA在慢性白血病中表达情况慢性粒细胞白血病慢性期（CP）组PRND mRNA阳性表达率90.9%（10/11）,表达水平0-1.033,平均表达水平0.276;加速/急变期患者组阳性率100%（6/6）,表达水平0.084-1.445,平均表达水平0.352,两组表达水平均高于NC组,差别有统计学意义（P值均小于0.05）,加速/急变期表达水平高于慢性期,但差别无统计学意义（P>0.05）。4急性白血病（AL）患者Livin、Smac及PRND mRNA表达情况与临床疗效的关系50例新近诊断AL患者中44例可进行疗效评估（1例早期死亡,5例未治疗）。37例Livin mRNA阳性表达患者中17例获完全缓解,完全缓解率45.95%（17/37）,7例Livin mRNA阴性表达患者均获完全缓解,完全缓解率100.00%（7/7）,Livin阴性（Livin-）患者组缓解率高于Livin阳性（Livin+）患者组,进行校正的卡方检验分析,两组缓解率差别有统计学意义（χ2=4.928,P=0.026<0.05）。32例Smac mRNA阳性（Smac+）患者组14例完全缓解,缓解率为43.75%（14/32）,12例Smac mRNA阴性（Smac-）患者组10例完全缓解,缓解率83.33%（10/12）,Smac-患者组缓解率明显高于Smac+患者组的缓解率,经普通卡方检验分析,两组缓解率差别有统计学意义（χ2=5.515 ,P=0.019<0.05）。32例Livin+Smac+患者14例完全缓解,缓解率43.75%（14/32）,明显低于Livin-Smac-患者缓解率100.00%（7/7）,（Fisher’s确切概率法,P=0.008<0.01）,5例Livin+Smac-患者中3例完全缓解,缓解率60%（3/5）,与Livin+Smac+组及Livin-Smac-组缓解率差别均无统计学意义（Fisher’s确切概率法,P值均大于0.05）。40例PRND阳性（PRND+）患者中20例完全缓解,缓解率50.00%（20/40）,PRND阴性表达（PRND-）患者组完全缓解率100.00%（4/4）,高于PRND+组患者缓解率,但经校正的卡方检验分析,尚不能认为两组缓解率有差别（χ2=1.927,P=0.165>0.05）。10例复发组病人仅2例经联合化疗后获完全缓解。其余8例（5例Livin+Smac+PRND+,2例Livin+Smac-PRND+,1例Livin+Smac+PRND-）均未获完全缓解。5相关分析表明在新近诊断白血病患者组Livin mRNA表达水平与Smac mRNA表达水平呈正相关（ r=0.545 ,P=0.0001<0.05）。结论1新近诊断急性白血病患者Livin mRNA表达水平明显高于正常对照组,复发组表达水平明显高于正常对照组,但与新近诊断组无显著差别。Livin mRNA阳性表达的急性白血病患者完全缓解率低于Livin mRNA阴性表达的急性白血病患者,提示Livin参与急性白血病的发生与发展,Livin mRNA高表达是急性白血病预后不良指标。2新近诊断急性白血病患者促凋亡蛋白Smac表达水平也明显高于正常对照组, Smac mRNA高表达患者Livin表达水平也较高,提示机体细胞癌变时Smac以拮抗Livin的作用来实现其促凋亡作用。因此,Livin表达水平增高的同时Smac也相应高表达。3新近诊断急性白血病组、持续完全缓解组及复发组患者PRND表达水平均明显高于正常对照组,提示PRND可能参与急性白血病的发生,但机制有待进一步研究。4在新近诊断白血病中Livin mRNA表达水平与Smac mRNA呈正相关。5慢性粒细胞白血病慢性期、加速/急变期患者Livin、Smac及PRND表达水平均高于正常对照组（P值均小于0.05）,且加速/急变期表达水平高于慢性期,但差别无统计学意义（P>0.05）。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 Livin、Smac 及PRND 在白血病中的表达及意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 叠朊蛋白与恶性肿瘤
• 致谢
• 个人简历